应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】是否需要去磷酸化
51/1返回列表
查看: 808  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】是否需要去磷酸化

pET29a质粒用kpnI和EcoRI酶切，酶切是分两步单酶切进行的，酶切后需要进行去磷酸化再和目的片段链接吗？
谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-04-07 21:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zmw_520

禁虫 (小有名气)
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-08 08:36:02
本帖内容被屏蔽
2楼2011-04-07 23:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-08 08:36:05
dhd997(金币+2): 很活跃，鼓励之 2011-04-08 08:50:53
引用回帖:
Originally posted by xiaoyu1014126 at 2011-04-07 21:09:37:
pET29a质粒用kpnI和EcoRI酶切，酶切是分两步单酶切进行的，酶切后需要进行去磷酸化再和目的片段链接吗？
谢谢！

没必要呢，实验步骤能省就省。
以前我会做去磷，后面发现不去磷也差不多，之后就省这一步了。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-04-07 23:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

p120933799

金虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-04-08 13:25:09
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 09:40:50
不用，除非有特别说明
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-04-08 11:56:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfb1020

金虫 (小有名气)
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 09:40:47
两次单酶切有没有完全切开的可能，为了尽量少出现假阳性要进行去磷酸化。如果你确保两次单酶切完全切开了，就不用去磷酸化。
赞一下 回复此楼
5楼2011-04-08 16:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoyu1014126 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭