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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

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帖子: 730
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虫号: 483157

[交流] 【求助/交流】是否需要去磷酸化

pET29a质粒用kpnI和EcoRI酶切，酶切是分两步单酶切进行的，酶切后需要进行去磷酸化再和目的片段链接吗？
谢谢！

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1楼2011-04-07 21:09:37

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sfb1020

金虫 (小有名气)

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xiaoyu1014126(金币+1): 2011-04-09 09:40:47

两次单酶切有没有完全切开的可能，为了尽量少出现假阳性要进行去磷酸化。如果你确保两次单酶切完全切开了，就不用去磷酸化。

5楼2011-04-08 16:12:43

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