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【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮,SDS-PAGE结果差异显著,这是为何?
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kerry2011
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 145.1
帖子: 42
在线: 18.9小时
虫号: 1031395
[交流]
【求助/交流】蛋白样品加热煮过和不煮,SDS-PAGE结果差异显著,这是为何?
我从一株细菌中筛选蛋白酶,发酵液测出了不错的蛋白酶活,但是发酵液超滤浓缩以后,样品加热煮过之后SDS-PAGE只在30K左右有一条带,不加热直接上样,SDS-PAGE在45-70K Da之间有多条带,这是为何?
发酵液通过55%的硫酸盐沉淀,重溶,透析,再跑SDS-PAGE,煮过的样品弥散,几乎没有主带,不煮的样品有多条带,这是为何?
请虫友们指教。
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木虫
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金币: 1257.9
帖子: 261
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虫号: 1037346
..
★ ★
kerry2011(金币
+1
):谢谢参与
wolfebst(金币+1): 谢谢参与 2011-04-13 14:30:07
加热煮沸就是为了破坏蛋白质的高级结构.煮过的蛋白跑胶就不会受到它本身高级结构的影响,只和大小相关.不煮的话,跑胶的速率就与很多其他因素相关,特别是高级结构.
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8楼
2011-04-13 14:26:57
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