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liuan6126铁杆木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】酵母PRS整合表达质粒使用的问题，我需要你的帮助，谢谢 已有4人参与
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我想在营养缺陷型酵母CEN.PK2-1C(MATa; ura3-52; trp1-289; leu2-3,112; his3Δ 1; MAL2-8C; SUC2)中整合表达几个基因，手头有pRS303，pRS304,pRS305，pRS306等质粒。 我现在存在一个很大的疑惑，即：我能不能先用其中一个质粒（假设为pRS303）表达一个基因，构建一株菌，命名A吧。我是不是可以继续使用另外三个质粒，继续整合表达新的基因到A中，这样最后，我可以在一株菌内，整合表达四个基因了。 这个问题的疑惑之处在于，我不是很确定，在后一个基因表达后，会不会破坏前面整合上去的基因呢？ 谢谢大家，这个问题对我很重要，请不吝赐教。 |
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susizheng
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liuan6126
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西瓜(金币+2): 不迟哈~鼓励热心的朋友！ 2012-02-15 22:20:18
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实在对不起，我很久没来了，刚看到，赶紧第一时间回复你，我不知道能不能上传附件，文章名字是‘A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae’。以后遇到类似的质粒不明确的事情，可以直接到NCBI上找这个质粒的原始文献（注意Title和Journal） LOCUS PRS304 4267 bp DNA circular SYN 14-SEP-1995 DEFINITION Yeast integrative vector pRS304 with TRP1 marker, complete sequence. ACCESSION U03436 VERSION U03436.1 GI:416305 KEYWORDS . SOURCE Cloning vector pRS304 ORGANISM Cloning vector pRS304 other sequences; artificial sequences; vectors. REFERENCE 1 (bases 1 to 4267) AUTHORS Sikorski,R.S. and Hieter,P. TITLE A system of shuttle vectors and yeast host strains designed for efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae JOURNAL Genetics 122 (1), 19-27 (1989) 实在抱歉，回复迟了，希望能对你用，祝进步 |
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z-w-p5楼2012-02-15 18:56:14
6楼2012-02-15 20:54:38
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