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ybh1987213

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】western blot 缺带断带

最近做Western blot 出现了比较诡异的问题，一个流程下来，胶片的曝光结果上有个别条带断开，或者干脆就缺失，包括泳道背景也丢失了，就好像膜上有个大气泡一样。但是膜用立春红染后相当完整，我抗体孵育的时候杂交袋中的抗体工作液也相当充盈，肯定没有气泡，不知是什么原因导致的。
初步怀疑可能在底物显色的时候用玻璃棒赶发光也所致，不知道有没有道理，各位有没有什么好办法可以避免这样的悲剧。

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1楼 2011-04-02 14:58:46

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ybh1987213

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by gyq625 at 2011-04-06 10:28:40:
您好，我是研一学生，也开始学做分子生物学这块，但我们研究室刚做这块，技术基础和条件什么都没有，只能摸索啊。那个western 所用的燃料一般选用什么较好哇，是SYBR GREEN还是考马斯亮蓝或者别的？一般做western ...

同感~WB有时候一些灵异事件实在解释不了~有时候不光是手法，还需要一定程度的运气。。。。