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ybh1987213

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】western blot 缺带断带

最近做Western blot 出现了比较诡异的问题，一个流程下来，胶片的曝光结果上有个别条带断开，或者干脆就缺失，包括泳道背景也丢失了，就好像膜上有个大气泡一样。但是膜用立春红染后相当完整，我抗体孵育的时候杂交袋中的抗体工作液也相当充盈，肯定没有气泡，不知是什么原因导致的。
初步怀疑可能在底物显色的时候用玻璃棒赶发光也所致，不知道有没有道理，各位有没有什么好办法可以避免这样的悲剧。

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1楼 2011-04-02 14:58:46

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75372017

木虫 (初入文坛)

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引用回帖:

Originally posted by ybh1987213 at 2011-04-07 10:27:43:
染胶就用考马斯亮蓝，染膜就用立春红，试剂什么的配方网上就有很多，大体都差不多，WB最关键的一点就是抗体抗体，抗体好闭眼睛都能做出来，如果新手的话建议你先拿内参抗体练手。差不多了再用实验样本，毕竟样本 ...

同感。。。不过内参练手没感觉，只要不拖尾，就能有漂亮的条带