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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】T4酶连体系
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】T4酶连体系

TAKARA的T4连接酶说明书上是25ul体系，有的人又说酶连体系越小效率越高，各位通常的酶连体系是多大啊？体系的组成呢？谢谢~~
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1楼 2011-04-01 14:21:50
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
1949stone(金币+3): 细致 鼓励 2011-04-06 14:05:18
要看是连接啥末端啥样本吧，不同的如果是一端是平的一端是突出的小一点的体系是有好处的，打NEB的400电话吧，他们会说的详细一些。呵呵，就说你用的是他们的酶，他们回答问题还是很耐心的。
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14楼2011-04-06 12:59:31
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-04-01 19:57:59
体系我一般用10或者20 uL（有点多哦）
除了酶和buffer体积固定，片段和载体根据浓度来分配。
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2楼2011-04-01 14:29:01
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-04-01 14:29:01:
体系我一般用10或者20 uL（有点多哦）
除了酶和buffer体积固定，片段和载体根据浓度来分配。

不错，是这样
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3楼2011-04-01 14:53:36
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shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+6): good 2011-04-02 12:33:58
越小碰撞几率越大嘛，相同浓度条件下，另：宝生物这个连接酶做粘端还行，说明书也没说平端要怎么做。我买过FERMENTAS的做过比较，它上面说酶用量加五倍，各种连接按照推荐体系，一下就连上了。后来也用粘端做过对比，宝生物的克隆只有不到的人家的三分一，效率不怎么样阿…
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4楼2011-04-02 08:50:54
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