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痴夷子皮

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[交流] 【讨论】清洗受污染的色谱柱,为何要用异丙醇?已有27人参与

前些时候,回帖建议虫友用异丙醇冲洗反相色谱柱。斑竹问我,为何要用异丙醇。

咳咳,平时不求甚解,所以一下子也答不上原因。

后来查了些资料,分享一下:

首先,异丙醇特殊的溶解性,异丙醇能和乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、二氯甲烷、DMF、DMSO、乙酸乙酯、乙醇、二乙醚、正己烷、甲醇、THF、甲苯、水、二甲苯等液相可能用到的几乎所有的溶剂混溶。混溶比例,不深究。

其次,使用流动相时,若溶剂的混溶性不好甚至不混溶,会形成乳化的小液滴,毁坏色谱柱。

由此可得知,异丙醇具有某些特点:“去污能力”强;不伤色谱柱。以它作为过渡溶剂和清洗受污染的色谱柱及液相配件,情理之中了。
注:异丙醇粘度大,会使压力上升。



另附被污染的正相、反相色谱柱的清洗方法。
反相色谱柱(C18、C8):
水/乙腈95/5
→100%乙腈
→乙腈/异丙醇75/25
→100%异丙醇
→100%二氯甲烷
→100%己烷
若需用到二氯甲烷、己烷,使用反相流动相前需用异丙醇过渡
根据污染物性质,选择合适的冲洗溶剂及程序


正相色谱柱(SiO2、Diol):
甲醇/三氯甲烷50/50→100%乙酸乙酯



还请各位多多交流,指点。
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Originally posted by tian0429 at 2011-03-31 23:39:38:
不要需按反方向在冲洗回来吗?
二氯甲烷何解

反方向,一般情况下都不用的。反冲对色谱柱柱效影响不好。

对于一些强保留组分,若异丙醇不能清洗干净,可以尝试使用二氯甲烷。异丙醇极性4.3,二氯甲烷3.4。
守候在风中的宁静。
4楼2011-04-01 08:08:27
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Originally posted by 408851978 at 2011-04-01 08:08:28:
要反向冲洗的

反冲对柱效不好。
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6楼2011-04-01 08:10:52
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Originally posted by tian0429 at 2011-04-01 09:52:27:
反向冲洗是指将流动相从正己烷冲回二氯甲烷、异丙醇等等再回到水

哦,明白你的意思了,但这样也得先用异丙醇过渡,反冲后,再用异丙醇过渡至水相。
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10楼2011-04-01 10:00:00
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Originally posted by guoyayun40 at 2011-04-02 14:41:59:
大侠:
    你好,我想问一下,我用异丙醇0.3ml冲了四五个小时吧,虽然柱压下降,但是还是高,如果用二氯甲烷冲会不会吧C18键冲断呀?
    谢谢

不会的,不过用二氯甲烷冲过后,记得先换异丙醇过渡,再换上反相流动相。
守候在风中的宁静。
15楼2011-04-02 23:17:36
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1258042楼: Originally posted by yilishanshan at 2012-04-12 01:23:17:
一直不懂为什么选择异丙醇,现在明白一二了,谢谢指教!

沉了这么久的帖子,还被发现,呵呵。
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23楼2012-04-12 08:18:13
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1258374楼: Originally posted by zly86 at 2012-04-13 17:39:59:
我的柱子用异丙醇甲醇冲的时候为什么柱压越来越高,到后来就不能用了

异丙醇粘度大,所以柱压偏高。流速低一下吧。
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26楼2012-04-13 17:53:20
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1287456楼: Originally posted by shangruohai at 2013-01-04 17:02:39
100%的异丙醇,黏度太大啊,我想问可以用正丙醇能代替异丙醇吗?

溶解性能不一样。不适宜。

流速第一点。
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32楼2013-01-04 17:05:40
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