| 查看: 4122 | 回复: 10 | |||
[交流]
【资源】正相HPLC色谱柱的清洗、再生和维护方法 已有10人参与
|
|
正相柱一般包括硅胶、CN基、Diol和氨基柱。最好是事先采用预防性的措施，如样品过滤、用预柱和保护柱的方法，以尽可能的减少色谱柱的污染。下面的方法有助于延长正相色谱柱的使用寿命，运用方法中的理念，也可以用来诊断解决色谱柱使用中的疑难问题。 清洗步骤 1. 每次清洗都用低流速起步，当检测到柱压稳定在一定水平后再增加流速。 2. 先用10柱体积不含其它添加剂的流动相中的弱溶剂，如正己烷、氯仿等反冲色谱柱。 3. 再用20柱体积的诸如二氯甲烷或异丙醇等流动相中的强溶剂反冲色谱柱。 4. 100%异丙醇的极性和正相洗脱能力足够把正相柱上的所有残留物清洗掉。如果异丙醇的清洗还不足以恢复色谱性能，则说明色谱柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法无法解决这个问题。色谱症状和清洗再生过后的色谱性能恢复情况往往能提供色谱柱真正存在问题的线索。 正相柱除水分 诸如保留时间漂移等选择性改变的一些色谱症状，可以归因于固定相的变化，而填料可能还是完好的。在正相色谱中，固定相的水分含量常常是个影响选择性的关键参数。大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分(正己烷20摄氏度下水分含量是0.0111% w/w ), 正相色谱柱中水分含量随时间的不同是导致选择性变化的最普通的一个因素。 两篇相关资料，个人感觉不错：《高效液相色谱方法及应用 于世林》 《 HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法》 用含2.5 % 二甲氧基丙烷(dimethoxypropane)和2.5 % 冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱30个柱体积，可以去除色谱柱中水分并恢复色谱柱原来或所需要的选择性。 考虑到从流动相和色谱柱中完全去除水分非常困难，还有个尚有争议的简单方法可以采用。使用水分含量可控的流动相(譬如和水半饱和)以一直保持最初的方法选择性，而不需要每次进行冗长的除水分步骤。不管何种情况，最重要的都是保持水分条件的一致性。 [ Last edited by wangleinhcll on 2010-4-10 at 11:22 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
厉娜
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有15人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有14人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有16人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有15人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有12人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 真心求教：常用制备或半制备hplc色谱柱有哪几种类型？
已经有3人回复
- 高效液相色谱柱清洗与再生方法 和 大孔树脂经验使用和方法
已经有71人回复
- 【教程】HPLC色谱柱选择与维护保养（安捷伦科技）
已经有180人回复
- 求助：关于辅料在HPLC中杂质峰很多，干扰多
已经有4人回复
- 请问，常规HPLC反相色谱柱可以耐受那些试剂进样啊？除乙腈、乙醇、甲醇等还有什么啊？
已经有8人回复
- 【讨论】清洗受污染的色谱柱，为何要用异丙醇？
已经有37人回复
- 【求助】新换上的以硅胶为填充剂的正相色谱柱如何洗脱！？
已经有5人回复
- 【求助】正相硅胶色谱柱柱效低了怎么再生处理？
已经有4人回复
- 【求助】HPLC分析样品中含有较高浓度的盐对色谱柱有影响吗？
已经有39人回复
- 【资源】HPLC：色谱柱的使用与维护
已经有12人回复
- 【讨论】清洗色谱柱的溶剂用什么最好
已经有16人回复
- 【求助】清洗色谱柱试剂
已经有8人回复
2楼2010-04-10 15:00:03
ccbright1016
金虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 2443.6
- 散金: 200
- 红花: 2
- 帖子: 326
- 在线: 36小时
- 虫号: 866081
- 注册: 2009-10-09
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
3楼2010-04-10 22:36:18
4楼2010-04-12 11:16:38
supercat0821
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 197 (高中生)
- 贵宾: 0.069
- 金币: 32390.8
- 散金: 72
- 红花: 18
- 帖子: 4291
- 在线: 1133.1小时
- 虫号: 948087
- 注册: 2010-01-25
- 专业: 质谱分析
5楼2010-04-12 12:48:36
6楼2010-04-13 10:26:08
7楼2010-04-14 10:15:14
8楼2010-04-16 15:27:06
9楼2010-04-16 15:56:44
10楼2010-05-14 15:14:11
