应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】CTAB 法提取DNA，克隆基因全长？
81/1返回列表
查看: 2118  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nnsulei

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】CTAB 法提取DNA，克隆基因全长？

CTAB 法 提取DNA结果不理想怎么回事？请各位高手指教。谢谢～
步骤：研磨，加样65度5毫升CTAB加1克研磨样品（有巯基乙醇）；温和混匀，65度30分钟，期间不时摇动使其混匀；加等体积的酚氯仿异戊醇抽提12000rpm/15min；取上清，加1/10体积的65度CTAB及加等体积的酚氯仿异戊醇抽提；重复之前步骤两次；取上清，沉淀；75%乙醇洗涤。


PS:基因组DNA做PCR容易吗？有CDNA全长序列，在基因组水平克隆带内含子的的全长，是否容易做？我已经用RACE方法克隆获得CDNA全长序列，但是基因组水平全长用跨ORF引物始终P不出来，求教，谢谢。

[ Last edited by nnsulei on 2011-3-27 at 10:55 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-22 15:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
nnsulei(金币+1): 2011-03-22 15:53:13
看上去还可以啊，做PCR应该没有问题吧，我提的比你还烂都P出来了，呵呵
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-22 15:50:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shan-sa

金虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-03-23 08:14:35
nnsulei(金币+3): 2011-03-23 10:24:58
结果还可以么~只是有轻微滴降解而已，操作过程有剧烈震荡，有降解就是难免的了，点样孔比较亮，应该是因为模板量较大造成的吧，不过，貌似有蛋白残余也会造成点样孔较亮~哈哈，做个PCR肯定么问题的啦~
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-03-22 21:14:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xp198766

铁杆木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1): 鼓励交流 2011-03-23 08:16:12
nnsulei(金币+1): 2011-03-23 10:25:33
已经很好了啊！P着试试看
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-03-22 23:22:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 很活跃，欢迎交流 2011-03-23 08:15:09
nnsulei(金币+2): 材料新鲜 2011-03-23 10:25:49
还可以啊，就是蛋白质多了点，还有点降解了。

方法也对。材料是否新鲜？
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-03-23 08:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nnsulei

金虫 (正式写手)
谢谢大家积极发言～
赞一下 回复此楼
7楼2011-03-23 10:26:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
DNA就是这样啊
回复此楼
8楼2011-03-23 22:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
就是他了6663楼
2011-03-22 16:12   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 nnsulei 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +6 Isak0320 2026-10-12 8/400 2026-10-12 20:09 by caixiaoye1
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 8/400 2026-10-12 18:09 by wangyl_123
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭