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[交流]
【求助/交流】CTAB 法提取DNA，克隆基因全长？
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CTAB 法 提取DNA结果不理想怎么回事？请各位高手指教。谢谢～ 步骤：研磨，加样65度5毫升CTAB加1克研磨样品（有巯基乙醇）；温和混匀，65度30分钟，期间不时摇动使其混匀；加等体积的酚氯仿异戊醇抽提12000rpm/15min；取上清，加1/10体积的65度CTAB及加等体积的酚氯仿异戊醇抽提；重复之前步骤两次；取上清，沉淀；75%乙醇洗涤。  PS:基因组DNA做PCR容易吗？有CDNA全长序列，在基因组水平克隆带内含子的的全长，是否容易做？我已经用RACE方法克隆获得CDNA全长序列，但是基因组水平全长用跨ORF引物始终P不出来，求教，谢谢。 [ Last edited by nnsulei on 2011-3-27 at 10:55 ] |
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2楼2011-03-22 15:50:42
结果还可以么~只是有轻微滴降解而已，操作过程有剧烈震荡，有降解就是难免的了，点样孔比较亮，应该是因为模板量较大造成的吧，不过，貌似有蛋白残余也会造成点样孔较亮~哈哈，做个PCR肯定么问题的啦~ 4楼2011-03-22 21:14:54
5楼2011-03-22 23:22:18
6楼2011-03-23 08:05:20
7楼2011-03-23 10:26:51
8楼2011-03-23 22:42:45
简单回复
就是他了6663楼
2011-03-22 16:12
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