24小时热门版块排行榜    

查看: 2601  |  回复: 25
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 hhhmonkey 的 10 个金币

hhhmonkey

铁杆木虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】DNA提取问题

求助,DNA用异丙醇沉淀时,会一下出现很多白色粉末,请问这是为什么?该怎么处理。谢谢
我把过程说详细一些:
我提的是土壤样,一加进异丙醇就立即出现白色粉末状物析出,是在液体相中,上清液加入0.6倍体积的异丙醇,需要混合均匀,混合后并不清透,反而有白色粉末状析出物,特别奇怪,

[ Last edited by hhhmonkey on 2011-3-17 at 10:53 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)


hhhmonkey(金币+1): 谢谢啊,我已经处理了 2011-03-29 22:13:02
可能是析出的NaAC,我提植物DNA时也经常见白色粉末,现在是用异丙醇沉淀后直接把絮状DNA挑到70%酒精里洗一下,再挑出来风干。
14楼2011-03-21 17:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clare420

新虫 (小有名气)


hhhmonkey(金币+5): 非常感谢啊,我已经处理了 2011-03-29 22:13:35
你这个情况我见过,如果你是用高盐除掉一些杂质的话,那么沉淀的时候异丙醇不要预冷。
18楼2011-03-29 11:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖
提DNA用的是高盐么?
2楼2011-03-16 19:17:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhhmonkey

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by hhhmonkey at 2011-03-16 18:23:43:
求助,DNA用异丙醇沉淀时,会一下出现很多白色粉末,请问这是为什么?该怎么处理。谢谢

是的,是用的高盐
3楼2011-03-16 22:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhhmonkey

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-16 19:17:33:
提DNA用的是高盐么?

是的,是用的高盐
4楼2011-03-16 22:46:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
Originally posted by hhhmonkey at 2011-03-16 22:46:08:
是的,是用的高盐

沉淀了多长时间?室温沉淀还是低温沉淀的?
5楼2011-03-16 23:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)



scelab(金币+1): 谢谢交流 2011-03-17 08:20:31
异丙醇沉淀没有特异性,你只能用70乙醇多洗几次了
6楼2011-03-17 07:15:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xwsooo

银虫 (小有名气)


怎么会是粉末?很奇怪,倒是会有一大团白色絮状样的,但是太多沉淀时可能是蛋白质或其他杂志
7楼2011-03-17 10:28:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)


会不会是干燥的时间太长,dna干透了,会不溶解的
8楼2011-03-17 10:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zmw_520

金虫 (小有名气)


蛋白没抽提干净吧
10楼2011-03-17 17:32:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜杜

金虫 (小有名气)


我也遇到过这种问题,很郁闷,不知道问什么
11楼2011-03-18 10:17:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhhmonkey

铁杆木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by 杜杜 at 2011-03-18 10:17:41:
我也遇到过这种问题,很郁闷,不知道问什么

你是怎么处理的最后?
12楼2011-03-20 00:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李子李

铁虫 (初入文坛)


hhhmonkey(金币+1): 谢谢啊 2011-03-29 22:12:39
可能是不溶性的蛋白吧,DNA吹干会是透明的,很容易就溶解的
13楼2011-03-21 16:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiadongliang

金虫 (正式写手)


hhhmonkey(金币+1): 谢谢啊,我已经处理了 2011-03-29 22:13:09
引用回帖:
Originally posted by hhhmonkey at 2011-03-16 18:23:43:
求助,DNA用异丙醇沉淀时,会一下出现很多白色粉末,请问这是为什么?该怎么处理。谢谢
我把过程说详细一些:
我提的是土壤样,一加进异丙醇就立即出现白色粉末状物析出,是在液体相中,上清液加入0.6倍体积的异 ...

有可能是盐析出,也有可能是蛋白析出了。
15楼2011-03-21 17:16:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ls2046

铁杆木虫 (著名写手)


hhhmonkey(金币+1): 谢谢啊,我已经处理了 2011-03-29 22:13:15
白色粉末正常,试验中时常出现,离心之后会聚集成一块,一般不会影响继续实验,不过最好是出现絮状沉淀,呵呵,,,
16楼2011-03-21 22:55:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)


蛋白质??
17楼2011-03-27 19:25:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clare420

新虫 (小有名气)


或者你降低一下高盐浓度。洗的时候70%的乙醇也不要预冷。
19楼2011-03-29 11:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wazlf

银虫 (正式写手)


hhhmonkey(金币+1): 谢谢啊,我已经处理了 2011-03-29 22:13:50
这个可能是你的蛋白没提干净,DNA浓度太高,DNA断裂成小片段,加异丙醇时就出现这样的问题!
20楼2011-03-29 11:55:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李子李

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by 另一个天堂 at 2011-03-27 19:25:40:
蛋白质??

杂质包括蛋白吗?主要目的是去蛋白的话异丙醇用不用遇冷呢,多谢指教
21楼2011-03-30 14:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李子李

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
Originally posted by clare420 at 2011-03-29 11:30:11:
你这个情况我见过,如果你是用高盐除掉一些杂质的话,那么沉淀的时候异丙醇不要预冷。

杂质包括蛋白吗?主要目的是去蛋白的话异丙醇用不用遇冷呢,多谢指教
22楼2011-03-30 14:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 李子李 at 2011-03-30 14:15:38:
杂质包括蛋白吗?主要目的是去蛋白的话异丙醇用不用遇冷呢,多谢指教

蛋白也是杂质,会影响后面DNA电泳。最好预冷,防止由于温度问题影响DNA。
23楼2011-04-03 12:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clare420

新虫 (小有名气)


我做的时候没有预冷,影响不大,不过可能如果杂质较多的话,温度对核酸影响会大点。
24楼2011-04-06 10:02:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crush_bc

铁虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
糖类或蛋白质吧~~可以重提取一次,或者降低样品量~~
25楼2011-12-06 23:23:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjie801284

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
沉淀时间不要过长!或改用乙醇沉淀!
26楼2011-12-07 19:07:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
4920532949楼
2011-03-17 10:47   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 hhhmonkey 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 北大教授何怀宏曾如此描述他的同行 +13 zju2000 2024-11-09 13/650 2024-11-16 07:45 by 080520dxf
[硕博家园] 和导师撕破脸了 +17 圆满123456 2024-11-13 21/1050 2024-11-16 00:30 by ZZZemmm
[论文投稿] chemical science和advanced science哪个好一点 +6 yly150 2024-11-12 6/300 2024-11-15 21:06 by hcj9909053
[考博] 中南大学 粉末冶金国家重点实验室 陈超教授课题组拟招收 1~2位博士研究生通知 +7 中南大学-金属材 2024-11-14 18/900 2024-11-15 20:22 by 中南大学-金属材
[考博] 随缘读博 一篇中科院一区Top 一篇中科院二区Top 两篇专利 +6 Ricoch4t 2024-11-13 15/750 2024-11-15 19:24 by 青青之洲
[论文投稿] 核心期刊那个阶段最难 +4 公共茅斯 2024-11-11 4/200 2024-11-15 16:44 by sugarmei
[教师之家] 大学老师 +11 考研一路顺风 2024-11-13 14/700 2024-11-15 15:24 by LNP@mRNA
[基金申请] 变性人申请基金咋算性别? +21 leicahfs 2024-11-11 21/1050 2024-11-15 14:54 by 跳鱼拨刺
[精细化工] 同一个反应相同的反应条件,是不是反应结果相差不大? +5 青霉素 2024-11-11 5/250 2024-11-15 13:43 by zyqchem
[硕博家园] 实验进度 +9 麻辣烫。 2024-11-11 14/700 2024-11-15 13:14 by hanweiguo
[考博] 联系的博导说有时间聊一聊 我回复了自己可以的时间后 博导就没再回复 +4 evan0489 2024-11-15 4/200 2024-11-15 13:10 by hanweiguo
[基金申请] 广东省自然科学基金-面上项目消息有了么? +4 pachang 2024-11-14 6/300 2024-11-15 09:39 by zhoulei7170
[基金申请] 求助 +4 Enenenene 2024-11-15 4/200 2024-11-15 09:36 by 榨菜拌青椒
[硕博家园] 课题和专业一点都不相关怎么办 +7 imt4n9 2024-11-11 10/500 2024-11-15 01:55 by 成长虫
[基金申请] 博后基金分组排名 +7 攻城2025 2024-11-14 7/350 2024-11-14 21:19 by 实验小白ha
[教师之家] 处在人生职业的分水岭 +4 otani 2024-11-13 4/200 2024-11-14 14:17 by mddzwo
[有机交流] 硫谜用双氧水氧化出现的困惑(老板说一定要用双氧水氧化做好)求指教 10+4 luowenwu 2024-11-10 15/750 2024-11-14 10:52 by luolinfeng
[论文投稿] 论文接受后,编辑部发邮件提醒缺少附件 15+4 上善若水明泪 2024-11-10 4/200 2024-11-12 14:24 by 北京莱茵润色
[论文投稿] renewable energy 添加作者 15+3 Hebauwww12 2024-11-09 4/200 2024-11-11 08:42 by 北京莱茵润色
[基金申请] 要求论文发表日期在项目执行期内,论文发表日期是在线日期还是见刊日期 +6 Jiangnanyu1 2024-11-09 7/350 2024-11-10 17:49 by jurkat.1640
信息提示
请填处理意见