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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教关于western blot转印方法的问题
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教关于western blot转印方法的问题

请各位赐教：
做 western blot 是用湿转好还是半干好？两种方法的优缺点是什么？限制是什么？谢谢大家！
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1楼 2011-03-15 15:02:41
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-04-14 22:22:35
xiaoli8609(金币+5): 2011-04-15 15:48:49
xiaoli8609(金币+2): 非常谢谢！ 2011-05-13 09:51:22
引用回帖:
Originally posted by xiaoli8609 at 2011-03-15 15:02:41:
请各位赐教：
做 western blot 是用湿转好还是半干好？两种方法的优缺点是什么？限制是什么？谢谢大家！

湿转效果更好，转的比较均匀也更充分，而且各分子量大小都可以转，缺点就是浪费缓冲液；半干操作简单，节省缓冲液，转小分量比较比较适合，一般100KD以上就不选择半干了。
总体来说要是平时做的不多，做科研的就用湿转；生物公司的做服务的还是多用半干，毕竟使用半干操作方便，工作效率高。
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2楼2011-04-12 15:42:17
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0640409

银虫 (小有名气)
xiaoli8609(金币+1): 2011-04-15 15:49:07
xiaoli8609(金币+1): 2011-05-13 09:51:40
刚开始跑western，半干的，都能跑出来，湿转还没试过
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3楼2011-04-14 21:09:59
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新人小玥

木虫 (正式写手)
xiaoli8609(金币+1): 2011-07-04 13:20:18
只用过湿转，因为听了很多人的推荐。可能这种比较好吧。
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4楼2011-04-16 22:56:49
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luohuacheng

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 最近很活跃，鼓励 2011-04-28 08:40:57
xiaoli8609(金币+1): 非常感谢 2011-05-13 09:52:00
湿转膜需要注意的就是，一定要在4度的环境，这样好转。两种转发都还可以的。
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5楼2011-04-27 22:02:09
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qgx1987

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
刚开始做western blot ，用半干转膜，效果挺好。
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6楼2011-07-15 18:14:20
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
相对而言，湿转的效果会好点，转的比较均匀，而干转会比较节省，但是较大或较小的蛋白一般采用半干转，所以，各有利弊吧
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7楼2012-07-09 22:28:42
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