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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求解蛋白质分离纯化的难题
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609351499

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】求解蛋白质分离纯化的难题

大家好，最近在做蛋白质的分离纯化实验，实验中遇到了一些难题，还请高手指点。
    我做真菌产一种酶的分离纯化，但是该菌也产很多多糖，不知用什么办法除去？
    对发酵液盐析的蛋白质实验时，经过离心，得到的片状物浮在液面上，管底部液体澄清，没有沉淀，请问这是什么原因，怎么解决？Sample Text
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1楼 2011-03-11 18:15:09
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1349426楼: Originally posted by 892091690 at 2012-03-17 12:18:08:
我在提取淀粉酶时用硫酸铵盐析沉淀 但是用量不知道多少 自己随便加了大约原菌液的5倍 后来一些列步骤下来 大概稀释了200倍 测OD值时怎么测都是0~0.100之间的数值 是不是我稀释的倍数太大了？如果有3毫升原菌液， ...

这个，有没有测过酶活力残留多少？原菌液的5倍是什么意思？感觉需要整理一下，说得详细一点。
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17楼2012-03-17 18:58:27
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)
★
609351499(金币+2):谢谢参与
我也遇到同样的事情，实际上那些漂浮物可以丢掉了，估计是一些多糖，你不放心的话，跑个电泳看看。我觉的管壁上多少会有些蛋白的，你洗洗看看。
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3楼2011-03-11 18:35:22
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)
★
609351499(金币+2):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 609351499 at 2011-03-11 18:15:09:
大家好，最近在做蛋白质的分离纯化实验，实验中遇到了一些难题，还请高手指点。
    我做真菌产一种酶的分离纯化，但是该菌也产很多多糖，不知用什么办法除去？
    对发酵液盐析的蛋白质实验时，经过离心，得到 ...

走一次凝胶色谱试试，分离到的组分测下糖的含量。
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4楼2011-03-11 20:46:55
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weishengsu5

木虫 (正式写手)
★
609351499(金币+2):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zyxme at 2011-03-11 18:33:05:

学习下
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5楼2011-03-11 20:55:07
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