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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】qRT-PCR疑问
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lixinna2009

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】qRT-PCR疑问 已有2人参与

想请教各位关于qRT-PCR的一个问题，在两步法qRT-PCR中，第一步首先合成cDNA，之后进行荧光定量pcr，但是在合成cDNA时，试剂盒中提供了oligodT和随机引物还有基因特异引物，三者应如何选择?用的是全式金的试剂盒
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1楼 2011-03-11 15:13:01
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lixinna2009

新虫 (初入文坛)
比较着急啊
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2楼2011-03-11 15:14:06
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yabxxh

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-03-11 20:46:36
这个在下略懂，简单地说，随机引物可用在任何RNA的反转录反应中，oligodT引物只能用在polyA结尾的mRNA的反转录反应中，而基因特异引物一般是用在RACE中用来反转录特异序列的，
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3楼2011-03-11 15:23:23
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yabxxh

木虫 (正式写手)
你扩增基因的话，一般选用oligodT就好了
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4楼2011-03-11 15:24:33
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lixinna2009

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yabxxh at 2011-03-11 15:23:23:
这个在下略懂，简单地说，随机引物可用在任何RNA的反转录反应中，oligodT引物只能用在polyA结尾的mRNA的反转录反应中，而基因特异引物一般是用在RACE中用来反转录特异序列的，

那我提的是rna，不想纯化mrna了，应该选用什么呢？是不是oligo和随机引物都可以啊？那一个比较好啊？
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5楼2011-03-11 17:26:17
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lixinna2009

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by yabxxh at 2011-03-11 15:24:33:
你扩增基因的话，一般选用oligodT就好了

谢谢啊！就是扩增基因然后做荧光定量，感觉也是应该用oligo呵呵谢谢啦
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6楼2011-03-11 17:28:15
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