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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办
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邓娟

金虫 (小有名气)

Diary

[交流] 【求助/交流】western blot的内参总是不齐怎么办 已有8人参与

我做的是动物组织蛋白，定量时定的0.997，变性的时候盖子也盖紧了的，上样的时候也没有漏样，可是显影得到的β-actin就是不齐，就是不知道哪里出问题了，很郁闷啊，β-actin一眼就看出来不齐，我很悲伤。
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就这么熬着，什么时候是个头……
1楼 2011-03-11 10:51:57
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邓娟

金虫 (小有名气)

Diary
引用回帖:
Originally posted by mafang68 at 2011-03-11 13:45:07:
呵呵，这是经常的事，换一批蛋白，重做

换一批就好了？不会吧，那这批的怎么办呢？
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就这么熬着，什么时候是个头……
3楼2011-03-11 14:15:59
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mafang68

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 哈哈 一样的 2011-04-23 10:56:00
呵呵，这是经常的事，换一批蛋白，重做
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木虫啦，哈哈
2楼2011-03-11 13:45:07
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mafang68

金虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 运气很重要 2011-04-23 10:56:21
呵呵，存在-80冻着，你再做一批也不一定结果就好，WESTERN这个东西很磨人的，不定哪天做出来
赞一下(2人) 回复此楼
木虫啦，哈哈
4楼2011-03-11 15:04:08
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didillytao

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
西瓜(金币+3): 鼓励交流！话说您现在已经达到银虫啦，愿意的话可以点击“升级”。 2011-04-21 23:30:36
首先好像用冻的样就不太好,因为虽然在-80但是也会有讲解,还有一个我觉得煮样也很重要,不能超过5分钟,否则就算盖了盖子挥发也比较大,煮样后最好在冰上冰浴1分钟,这样蒸发的水汽会重新凝结,然后再离心,这样就不容易不齐了~~
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小鹿~~
6楼2011-03-11 16:37:17
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