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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒回收、连接时遇到的问题，急求！
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sirius8528

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】质粒回收、连接时遇到的问题，急求！ 已有5人参与

我在做琼脂糖核酸电泳时发现回收的线性条带和质粒空白跑的差不多，连接时加了PEG就会堵孔，而其他位置没什么变化。
图1中前两个条带是质粒空白，后两个是回收。
图2中前两个条带是质粒空白，后两个是连接，其中第四个加了PEG，第三个没加。
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1楼 2011-03-07 09:26:13
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sirius8528

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-07 14:12:27:
线性化的质粒不是单一条带吗？为什么这么多带？切胶的时候线性化质粒条带是什么样的？

切胶的时候是一个条带，但回收完了再跑就成这个样子了。
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7楼2011-03-07 16:12:52
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walker2898

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
翱宇(金币+2): 鼓励上图交流，不知楼主怎么操作的，我感觉这类实验不该出问题，回收胶时都用柱子，也没有什么需要特别注意的事项，再者连接时怎么会需要用PEG呢，这个试剂会起到什么作用！其实楼主可以详细些，试剂盒的公司，具体的操作步骤，这样其他人可能看得更清楚些了，易于帮你找到原因！ 2011-03-07 17:09:46
我发现你这两个图就没有什么变化啊。为什么回收后有两条带啊？
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2楼2011-03-07 13:23:09
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sirius8528

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by walker2898 at 2011-03-07 13:23:09:
我发现你这两个图就没有什么变化啊。为什么回收后有两条带啊？

图1里第三条是回收的线性条带，第四条回收的是堵孔的。
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3楼2011-03-07 13:36:19
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
线性化的质粒不是单一条带吗？为什么这么多带？切胶的时候线性化质粒条带是什么样的？
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Thank-you，so-blue.
4楼2011-03-07 14:12:27
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