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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC有鬼峰出现，急寻解决方案
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50528061

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC有鬼峰出现，急寻解决方案已有40人参与

A相是25mmol KH2PO4水溶液，B相是乙腈，方法为0-5min，5%B；5-12min，5%-60%B；12-24min,60%B；24-34min，5%B。
   岛津四元泵，检测器为PDA的，每次都会在14.5min出现鬼峰（检测波长为210nm）
    走空白也有，重新配缓冲盐仍然有，关键换柱子走空白也有此峰出现（出峰时间不一样，峰型大致一致），更换缓冲盐为去离子水走空白，基线平稳。
    首先考虑是流动相出了问题，但缓冲盐是每天重新配，0.22um的膜过滤后超声，每天走样之前首先走空白，峰高时高时低，重要的是中间产物的峰就出在14.5min，鬼峰和主峰的紫外吸收不一样，很明显包在主峰里面了，很苦恼，找不到原因在哪。
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1楼2011-03-05 10:13:44
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pplover(金币+1): 感谢交流。 2011-03-05 21:25:54
出现鬼峰的原因一般有：
1、进样阀污染
2、样品未知物
3、柱未平衡
4、TFA氧化
5、水污染
根据楼主所析，以上原因几乎都可以排除了。。。
还真想不到原因。。。
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守候在风中的宁静。
7楼2011-03-05 17:00:16
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pplover(金币+1): 感谢分析。。 2011-03-05 21:24:23
一、鬼峰：既不是主峰，也不是杂质峰，是不能说明其来源的峰.!
出现原因：
1.柱吸附样品，随后解吸  2.注射器污染  3.样品量太大  4.进样技术差
......

业余的表示柱子既然没问题，难道是注射器的问题？！
赞一下(3人) 回复此楼
努力奋斗！！！
2楼2011-03-05 10:29:15
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50528061

金虫 (小有名气)
进样系统的污染是可以排除的吧，走空白根本就没进样呀
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3楼2011-03-05 10:33:07
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JLU_chem_man

新虫 (正式写手)

质谱蛋白质学习者
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
喔！我是做质谱的对此也不大了解就是上课时听过一些！坐等高人了
赞一下(1人) 回复此楼
努力奋斗！！！
4楼2011-03-05 10:37:39
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