应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于引物设计的问题
61/1返回列表
查看: 777  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王有朝

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于引物设计的问题

DNA不是包含内含子吗。NCBI给出的序列包括内含子序列吗？如果包括内含子序列那么我们对一个基因扩增是不是要提取全RNA反转录成cDNA后再设计引物对这一基因进行扩增？还是直接通过NCBI上的序列设计引物进行扩增？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-03 17:10:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-05 00:45:31
前体rna含有内含子，直接通过NCBI上的序列设计引物进行扩增
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-03 18:36:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏尔list

金虫 (著名写手)
★
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-05 00:45:35
NCBI给的序列是mRNA~Blast得到DNA序列~扩基因就是你说的提RNA反转再设计引物~
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-03 18:57:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王有朝

新虫 (小有名气)

你好

引用回帖:
Originally posted by 夏尔list at 2011-03-03 18:57:23:
NCBI给的序列是mRNA~Blast得到DNA序列~扩基因就是你说的提RNA反转再设计引物~

我的意思还是没表达明白。我要扩增一个基因的片段（不用克隆到整个基因），那我是直接提DNA进行扩增还是提RNA进行反转录再扩增？
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-04 22:03:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
一般都是逆转成cDNA以后再进行扩增的。
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-05 10:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏尔list

金虫 (著名写手)
王有朝(金币+2): 谢谢 2011-03-06 20:50:55
引用回帖:
Originally posted by 王有朝 at 2011-03-04 22:03:58:
我的意思还是没表达明白。我要扩增一个基因的片段（不用克隆到整个基因），那我是直接提DNA进行扩增还是提RNA进行反转录再扩增？

在NCBI上比对，看你的基因有没有内含子，没有内含子的话直接DNA，有内含子的话当然是提RNA然后反转录了。
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-05 10:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王有朝 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭