应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教关于毕赤酵母表达外源基因
51/1返回列表
查看: 1913  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教关于毕赤酵母表达外源基因

各位大虾，本人最近在构建一株  表达原核菌株一个酶  的毕赤酵母重组菌，现在菌株已经得到一批，之前通过提取染色体进行PCR验证，用的是目的基因的引物，结果是有的，但是用AOX引物进行PCR的时候，结果总是和文献上面说的不对应，想着先摇下瓶看看，结果摇瓶结果的表达量是奇低啊，特别特别低，我后面是用3%的甲醇诱导的，按理说应该是有结果的，唉，照着这个速度下去，我真是怀疑自己到时候毕不了业啊！！！！希望各位高手指导一二，不胜感激~
哦，还有能不能用硫酸铵浓缩一下啊？我也看了一些资料，具体有高手用过这种方法没有？能否介绍下？再次感谢！！

[ Last edited by dhmdddd on 2011-2-28 at 15:32 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-02-28 15:30:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dhmdddd at 2011-03-01 10:51:51:
因为想利用毕赤酵母的分泌表达，最近也想换表达体系了，就是还没有想好！谢谢！哦，还有你用TD-PCR是P  AOX的吗？

[ Last edited by dhmdddd on 2011-3-1 at 10:53 ]

恩，是的。
回复此楼
6楼2011-03-01 12:48:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
dhmdddd(金币+1): 还是十分感谢~ 2011-03-01 10:50:36
只做过原核表达，正在学习昆虫细胞表达，酵母至今还没做过。。。帮不上忙
赞一下 回复此楼
2楼2011-02-28 17:23:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
dhmdddd(金币+1): 谢谢~ 2011-03-01 10:50:52
目的基因用AOX引物扩增的话，可能不是很好扩增，当时用的TD-PCR做的，效果很好。
另外不知道原核的基因为啥选择真核表达系统呢？用原核表达系统不是又方便，而且密码子的偏好性可能更好。
赞一下 回复此楼
3楼2011-02-28 21:29:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-02-28 21:29:09:
目的基因用AOX引物扩增的话，可能不是很好扩增，当时用的TD-PCR做的，效果很好。
另外不知道原核的基因为啥选择真核表达系统呢？用原核表达系统不是又方便，而且密码子的偏好性可能更好。

因为想利用毕赤酵母的分泌表达，最近也想换表达体系了，就是还没有想好！谢谢！哦，还有你用TD-PCR是P  AOX的吗？

[ Last edited by dhmdddd on 2011-3-1 at 10:53 ]
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-01 10:51:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +6 xhuama 2026-03-02 7/350 2026-03-02 21:23 by kingkocxr
[考研] 289求调剂 +3 BrightLL 2026-03-02 4/200 2026-03-02 21:17 by BrightLL
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 材料学硕318求调剂 +10 February_Feb 2026-03-01 10/500 2026-03-02 20:18 by hypershenger
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[考研] 材料复试调剂 +5 学材料的点 2026-03-01 6/300 2026-03-02 20:01 by hypershenger
[考研] 302材料工程求调剂 +5 Doleres 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:53 by 张晓芳0105
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考博] 26超级电容器申博 +3 dhdjdjend 2026-02-25 3/150 2026-03-02 19:21 by 轻松不少随
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +4 awaystay 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:33 by yeahyou
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 14/700 2026-03-02 16:09 by 今夏不夏
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考研] 338求调剂 +3 18162027187 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:12 by houyaoxu
[考研] 材料与化工328求调剂 +3 。，。，。，。i 2026-03-02 3/150 2026-03-02 13:09 by houyaoxu
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭