| 查看: 2021 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】关于建立cDNA文库的诸多问题，拜请解答
|
|||
|
1、clontech的smarter kit大家有米有用过？效果怎样？ invitrogen的有用过的米？多少钱买的？效果捏? 2、质粒文库跟酵母文库差别大吗？我想筛est，然后做表达。 3、clontech的技术客服说起始不用mRNA也可以，用总RNA就行，还声称10ng总RNA就可以。大家觉得靠谱吗？ 4、关于mRNA质量的验证，说是有smear，smear是什么样子的？能否提供图片，实在不行文字说明，举例子，打比方都行。 5、载体选择上有没有什么讲究？ To check quality, analyze 100 ng of your mRNA using a Bioanalyzer, or by performing agarose gel electrophoresis using a 1% E-Gel® EX Gel (see page 45 for ordering information). Your mRNA will appear as a smear, with the greatest intensity in the range of 1 to 3 kb. Some rRNA bands may still be faintly visible. If you do not detect a smear, or if the majority of the smear is significantly lessthan 1 kb, you will need to repeat the RNA isolation. Be sure to follow the recommendations listed on the previous page to prevent RNase contamination. 这里关于mRNA电泳的描述，我能否认为smear是弥散的条带。。。。 谢谢各位啦！！ 鞠躬！！ [ Last edited by sai00fuji on 2011-2-26 at 20:42 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有147人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于超级计算机的安装权限问题：不能用sudo命令，该如何是好？
已经有18人回复
- ----关于CSC群里提到的评审以电子材料为主，纸质材料备案的问题-------
已经有24人回复
- 关于托福报班的一个问题
已经有6人回复
- 关于reject and resubmit 的问题
已经有14人回复
- 16S rDNA文库与cDNA文库的选择
已经有5人回复
- 请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家
已经有7人回复
- 用clontech的SMART建cDNA文库，连接转化不成功，求助！！急死了！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取质量验证及反转后cDNA质量验证问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】谁用SMART的cDNA文库构建试剂盒？？？
已经有6人回复
- 【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
人生已过半程，不惑之年渐近，回望来时路，满心皆是感恩。
+5/1690
-
青岛高校2026招生硕士研究生
+5/755
-
绍兴大学博士教师招聘1位（化学化工相关）
+5/275
-
香港中文大学（深圳）靳羽华教授交叉实验室招募2026年材料学博士生（光致变色）
+2/150
-
中国电气装备集团研究院招收AI+材料等相关岗位实习生
+1/87
-
华南理工-广中医联合招收生物医学与材料交叉学科博士生
+1/82
-
散金币，求基金中标！！
+1/61
-
春眠不觉晓
+1/24
-
巴黎西岱大学（Université Paris Cité）Fayna MAMMERI 导师寻找CSC公派博士生
+1/22
-
招收专业代码08的学硕！
+1/15
-
【深圳理工大学】院士工作站招聘博士后-电催化和有机电化学
+1/12
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/10
-
南昌航空大学代威力教授招收光催化和光热催化研究方向博士生
+1/8
-
计算机(11408)考研361分求调剂
+1/8
-
宁波东方理工大学余鹏课题组2026年上海交大联培博士生、博士后、科研助理招聘
+1/7
-
欢迎生物与医药、药学、化学等相关专业的同学
+1/4
-
招收化工与材料学科点研究生
+1/3
-
Top-88悉尼科技大学数据科学/AI 招收2027年入学 校奖 博士生1到2名(国际和本地学生）
+1/3
-
2026考研的同学，分数不够？想调剂上岸的同学，来看
+1/2
-
“机械、材料”招生
+1/1
9楼2011-02-26 20:48:44
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
- MolEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113358
- 帖子: 28943
- 在线: 3684.8小时
- 虫号: 464575
2楼2011-02-25 21:31:38
3楼2011-02-25 22:05:44
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励参与交流 2011-02-26 09:05:29
sai00fuji(金币+12): 2011-02-26 17:15:37
lstt09nk(金币+3): 鼓励参与交流 2011-02-26 09:05:29
sai00fuji(金币+12): 2011-02-26 17:15:37
|
1.用过clontech的不错，invitrogen的没有用过，不敢评价，不过invitrogen也是大牌子，具体选择什么试剂盒还是楼主你比较一下两个试剂盒的说明书最好 2.通常的文库都是测序用的，除非特殊的试剂盒，例如酵母双杂交文库试剂盒。我看你的目的应该就是构建一个普通的cDNA文库，然后测序，然后选择目的的基因酵母表达吧。 3.clontech的SMART就是直接用的总RNA，你看一下说明书就知道了，不用纯化mRNA的 4.smear说的是双链cDNA，类似于沙发发的图，好的双链图谱是smear+几条特征带，因样品不同而异 5.不知道你说的什么载体，是构建文库的载体吗，每一种试剂盒都有固定的载体。一般选择质粒的载体吧 |
4楼2011-02-25 22:51:39
