| 查看: 1916 | 回复: 11 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】关于建立cDNA文库的诸多问题，拜请解答
|
|||
|
1、clontech的smarter kit大家有米有用过？效果怎样？ invitrogen的有用过的米？多少钱买的？效果捏? 2、质粒文库跟酵母文库差别大吗？我想筛est，然后做表达。 3、clontech的技术客服说起始不用mRNA也可以，用总RNA就行，还声称10ng总RNA就可以。大家觉得靠谱吗？ 4、关于mRNA质量的验证，说是有smear，smear是什么样子的？能否提供图片，实在不行文字说明，举例子，打比方都行。 5、载体选择上有没有什么讲究？ To check quality, analyze 100 ng of your mRNA using a Bioanalyzer, or by performing agarose gel electrophoresis using a 1% E-Gel® EX Gel (see page 45 for ordering information). Your mRNA will appear as a smear, with the greatest intensity in the range of 1 to 3 kb. Some rRNA bands may still be faintly visible. If you do not detect a smear, or if the majority of the smear is significantly lessthan 1 kb, you will need to repeat the RNA isolation. Be sure to follow the recommendations listed on the previous page to prevent RNase contamination. 这里关于mRNA电泳的描述，我能否认为smear是弥散的条带。。。。 谢谢各位啦！！ 鞠躬！！ [ Last edited by sai00fuji on 2011-2-26 at 20:42 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有165人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于超级计算机的安装权限问题：不能用sudo命令，该如何是好？
已经有18人回复
- ----关于CSC群里提到的评审以电子材料为主，纸质材料备案的问题-------
已经有24人回复
- 关于托福报班的一个问题
已经有6人回复
- 关于reject and resubmit 的问题
已经有14人回复
- 16S rDNA文库与cDNA文库的选择
已经有5人回复
- 请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家
已经有7人回复
- 用clontech的SMART建cDNA文库，连接转化不成功，求助！！急死了！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取质量验证及反转后cDNA质量验证问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】谁用SMART的cDNA文库构建试剂盒？？？
已经有6人回复
- 【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答
已经有12人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
武汉纺织大学电子与电气工程学院------院长团队招聘光电、材料类博士，博士后
+1/497
-
限广州，征女友
+2/96
-
美国密歇根州立大学林学系杜海顺课题组招收全奖博士生及联合培养博士生
+1/77
-
国重点实验室双一流A类长江学者团队招2026年全日制博士1-2名/博后1-2名
+2/70
-
山东征女友，坐标济南
+1/64
-
87 年东北小哥定居苏州（沪杭亦可），诚寻携手余生的你
+1/58
-
中国地质大学（北京）王琳课题组招收2026年硕转博/申请-考核博士研究生-1月8日截止
+1/45
-
2026博士申请——有机化学\计算化学\药物化学方向
+1/44
-
华中科技大学龚江研究员课题组诚招博士研究生、科研助理和博士后
+2/34
-
杨老师招收联合培养硕士、博士生或客座学生
+1/25
-
南京工业大学招收2026年全日制学术博士（供热、供燃气通风与空调）
+1/11
-
博士/硕士招生
+1/10
-
废旧塑料热解油采购
+1/6
-
海南大学化学院—功能分子器件团队博士后招聘
+1/4
-
澳门大学 应用物理及材料工程研究院 潘晖教授课题组诚招博士后
+1/4
-
英国博导招CSC博士生
+1/2
-
西南交通大学李义兵课题组博士及博士后招聘
+1/2
-
求博导收留
+1/1
-
西交利物浦大学——全奖博士名额（基因组学方向）
+1/1
-
诚邀加盟！青岛大学郑晓钦教授团队诚招博士研究生、博士后及青年英才
+1/1
3楼2011-02-25 22:05:44
|
再具体问一下，clontech的kit，起始需要总RNA大约多少？全长率能达到多少？ To check quality, analyze 100 ng of your mRNA using a Bioanalyzer, or by performing agarose gel electrophoresis using a 1% E-Gel® EX Gel (see page 45 for ordering information). Your mRNA will appear as a smear, with the greatest intensity in the range of 1 to 3 kb. Some rRNA bands may still be faintly visible. If you do not detect a smear, or if the majority of the smear is significantly lessthan 1 kb, you will need to repeat the RNA isolation. Be sure to follow the recommendations listed on the previous page to prevent RNase contamination. 这里关于mRNA电泳的描述，我能否认为smear是弥散的条带。。。。 谢谢~ |
6楼2011-02-26 17:33:53
8楼2011-02-26 20:44:35