应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教下巢式PCR与二次PCR的区别
51/1返回列表
查看: 4217  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wwling

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教下巢式PCR与二次PCR的区别 已有12人参与

最近纠结于这个问题，具体的是因为不太懂巢式PCR，是不是只要有两对引物就可以呢？看网上说的是直接拿第一轮PCR产物为模板做第二轮扩增，想问的是为什么不直接用第二轮的引物扩增，得到的产物做模板继续用第二轮引物扩增（即二次PCR）？
  望虫子们指导下~~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-02-22 17:35:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 谢谢交流 2011-02-23 09:40:27

两轮PCR增强特异性，排除序列相似的模板
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-02-22 21:53:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

abc5710110

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): good 2011-02-22 18:39:29

在百度百科上找到些关于巣式PCR的信息，与普通PCR相比，优点主要的提高了特异性，有效的减少了错配影响。
http://baike.baidu.com/view/688277.htm
赞一下(2人) 回复此楼
强化多边交流，实现互利共赢
2楼2011-02-22 18:33:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

建议你读一下基因工程这本书
赞一下(1人) 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
3楼2011-02-22 18:37:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+6): good 2011-02-23 09:40:00

巢式PCR虽然也是扩增两次，但是跟二次PCR相比，它的优势是多方面的。

巢式PCR的两对引物是嵌套的，即第二对引物是在第一对引物往里的。

这点区别产生的优点很多：能够提高检测的特异性，在巢式过程中往往第一轮的PCR

产物跑电泳啥都看不到，但是经过第二轮的PCR，产物就很亮了。这点我深有体会，

曾经试验室里一个兄弟帮别人检测黄瓜根际真菌，只要一个孢子，液氮碾磨，做巢式

就能检测出来。

这个优点是二次PCR所不能媲美的。



另外还有一点就是从酶的角度分析，你从3kb的片段上扩1kb的序列的效率要比1kb设

计引物扩增自身高的多得多。聚合酶起作用的时候同样需要扩增起始位点的上游有一

段序列，方便结合。所以说，巢式PCR在检测中的检测限要比二次PCR低的低得多，要

更加灵敏。尤其是样品中目的序列的丰度较低的情况下，巢式PCR的优势就展现出来了。
赞一下(4人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2011-02-22 18:40:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +9 Ymlll 2026-03-18 12/600 2026-03-20 00:01 by 23Postgrad
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +18 rare12345 2026-03-18 18/900 2026-03-19 22:36 by 学员8dgXkO
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 346求调剂[0856] +3 WayneLim327 2026-03-16 6/300 2026-03-19 11:21 by WayneLim327
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-18 4/200 2026-03-18 21:47 by 尽舜尧1
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭