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【求助/交流】做realtime-PCR,退火温度很重要吗?
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xnbioinfor
铜虫
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[交流]
【求助/交流】做realtime-PCR,退火温度很重要吗?
要做realtime-PCR,需不需要摸索最适退火温度? 望指点
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1楼
2011-01-21 10:42:28
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xnbioinfor
铜虫
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引用回帖:
Originally posted by
love_st
at 2011-01-21 10:43:52:
需要
为什么呀? 怎么摸索呢?是不是要先设个温度梯度做个半定量PCR
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3楼
2011-01-21 10:46:29
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三磷酸腺苷
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★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
非常必要摸索条件
因为退火温度能够影响特异性以及PCR效率
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4楼
2011-01-21 11:09:25
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zhp1984816
铜虫
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虫号: 1190315
★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
我们实验室都没有摸索,一套程序做所有,但是有些特殊的引物,比如TM值特别的高的,还是会摸索一下提高退火温度看看,但是普通的引物我们一般都那么一套程序下来挺好的
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5楼
2011-01-21 12:49:23
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j2
木虫
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在线: 108.8小时
虫号: 452275
★
xnbioinfor(金币
+1
):谢谢参与
做个梯度吧,没有非特异片段最重要
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9楼
2011-01-21 14:34:12
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