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【求助/交流】pcr反应目的条带很浅,引物二聚体很亮
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pxm0705
铜虫
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在线: 7.8小时
虫号: 1100783
[交流]
【求助/交流】pcr反应目的条带很浅,引物二聚体很亮
请问一下各位高手,我PCR反应后目的条带
很浅,引物二聚体条带很亮,是什么原因?之前预做过几次都没有出现这样的问题,条件,引物.模板都没有变.谢谢!这是出现问题的图片(最下面的一条是60bp左右的引物二聚体)
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1楼
2011-01-16 22:14:27
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pop_hjx_41
铜虫
(初入文坛)
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在线: 7.3小时
虫号: 866899
★
pxm0705(金币
+1
):谢谢参与
我pcr的时候也会有这样的问题 如果引物的量降低一下 会不会好一点呢 请高手们解决一下帮忙一起
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29楼
2011-02-03 22:39:56
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翱宇
禁虫
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★ ★ ★
pxm0705(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-01-17 09:18:35
你的PCR条件是什么呢?(退火温度,PCR循环数,延伸时间)我感觉可以提高退火温度,可以做个温度梯度PCR,然后跑琼脂糖胶看结果。其实一般都有引物二聚体的,只要目标条带很亮就行,我怎么看你有两条带,究竟哪一条是你所需要的呢?
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2楼
2011-01-16 22:23:38
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wangy0908
金虫
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★
pxm0705(金币
+1
):谢谢参与
我也遇到同样的问题。想问问如何优化反应条件的呢。引物是特异的,但是始终扩出来有多条带!
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3楼
2011-01-17 05:47:10
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lixg
铁杆木虫
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★ ★
pxm0705(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+1): 经验之谈? 2011-01-17 09:18:54
提个建议,绝不是做广告。可以试试NEB公司的超保真酶Phusion,效果应该不错。
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5楼
2011-01-17 08:31:01
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?磭Y壹笑
4楼
2011-01-17 08:14
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pxm0705(金币
+1
):谢谢参与
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