24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 983  |  回复: 3

mbright

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】【求助/交流】蛋白质电泳求助 已有3人参与

我要细胞破碎后进行蛋白质电泳。我用溶菌酶作用细胞后,再用上清液再进行蛋白质电泳,跑不出来带。是否是溶菌酶作用细胞后,细胞本身的蛋白酶会释放出来,降解其它蛋白。我想换一种其他的细胞破碎方法。用抽提DNA的裂解液裂解细胞后,再离心用上清液来蛋白质电泳是否可以?另外,我在网上搜索到下面一种方法,不知是否可行:如果是做小量菌液,跑PAGE胶看其表达情况的话,可以直接加蛋白loading buffer煮沸5分钟即可,需注意的是上样前要离心12000rpm至少5分钟,然后上样时,枪头别吸最底下的。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhon86

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-02 13:14:30
http://bbs.biogo.net/simple/?t166360.html
这上面应该可以帮助你解决……
2楼2011-01-01 23:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):谢谢交流 2011-01-02 13:14:40
跑SDS-PAGE的话直接用菌体,不需要破碎细胞,方法就是你说的:发酵液离心收集菌体,直接加蛋白loading buffer煮沸3-5分钟,上样前要离心12000rpm至少5分钟,取上清上样,注意不要吸到沉淀即可。
3楼2011-01-02 10:08:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengfei2050

铜虫 (正式写手)

送鲜花一朵
收了,谢谢!
comeon
4楼2011-07-16 12:18:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mbright 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 0854求调剂 +5 assdll 2026-04-05 5/250 2026-04-10 15:32 by 高维春
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 298求调剂 +8 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 10/500 2026-04-10 11:25 by 高维春
[考研] 269电子信息求调剂,可转专业 +9 独酌wl 2026-04-06 9/450 2026-04-09 20:55 by laoshidan
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +5 汪某. 2026-04-09 5/250 2026-04-09 15:38 by 蒋皓禹
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 280求调剂 +5 兮兮夜夜 2026-04-09 8/400 2026-04-09 11:15 by 兮兮夜夜
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 生物医药调剂|SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 346分的生物与医药08600求调剂 +6 常雨阳上岸 2026-04-05 7/350 2026-04-06 12:36 by lys0704
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
信息提示
请填处理意见