应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】6Kb的DNA片段怎么扩增啊？
51/1返回列表
查看: 3484  |  回复: 47
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

kinglong09

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】6Kb的DNA片段怎么扩增啊？

最近扩增一个约6kb的DNA片段，总扩不出来。我用的是Takara的LA Taq，产物经琼脂糖凝胶检测，一点都没有
请问，是怎么回事？
敬请各位虫友指点。
谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼2010-12-30 18:25:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

srlee

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
kinglong09(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1):谢谢参与 2011-01-11 16:13:46
引用回帖:
Originally posted by kinglong09 at 2010-12-30 18:25:30:
最近扩增一个约6kb的DNA片段，总扩不出来。我用的是Takara的LA Taq，产物经琼脂糖凝胶检测，一点都没有
请问，是怎么回事？
敬请各位虫友指点。
谢谢！

用TakaRa的LA Taq扩增就行了，人家公司30多K的片段都做出来了呢！
我觉得关键要把握好扩增的条件，如6k的片段，退火55℃ 1min，延伸72℃ 5min试一下看看！
赞一下(2人) 回复此楼
25楼2011-01-02 19:20:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 48 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)
★
kinglong09(金币+2):谢谢参与
LA Taq我扩过最长的有5 K +,6 K可能有点悬，但也不一定是酶的问题，也有可能是引物的问题，或者退火温度的问题。将PCR条件优化下试试看。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-30 18:44:53
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangzhiang

铁杆木虫 (正式写手)
★
kinglong09(金币+2):谢谢参与
6K有点长，再摸索下条件，设个温度梯度看看
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-12-30 18:48:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
kinglong09(金币+1):谢谢参与
6k还好吧，呵呵，我都没有用LA taq ，都是用的Primer STAR，注意延伸时间的设置。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-12-30 19:56:09
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 48 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭