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kong10

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[交流] 【求助/交流】蛋白含量测定已有4人参与

采用考马斯亮蓝测蛋白含量时，样品中有叶绿色等色素，这样会干扰结果吗？怎样纯化样品，主要是怎么去除色素干扰！灰常感谢！

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1楼 2010-12-28 21:46:32

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kong10

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Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-28 21:49:16:
样品未经纯化么？叶绿素经过纯化应该很好去除的。用分子筛或者离子交换柱都可以。

我做的是酶活的测定，怕酶失活，所以很多方法都用不了，刚着手，菜鸟一个，还望多指点

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5楼2010-12-29 11:22:02

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kong10

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Originally posted by ws19861025 at 2010-12-28 22:30:20:
感觉普通柱子就可以吧，分子量差多少试试

用G—25过柱后没效果啊，不过柱子采用的是离心，不是洗脱液洗脱，这样可行吗？灰常感谢

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7楼2010-12-29 11:24:09

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kong10

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Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-29 11:23:17:

恩，很多纯化步骤还是挺温和的，不会那么容易失活的，呵呵。

我用的是G-25柱，但是用的是离心方法，不是洗脱液洗脱，请问这样有效果吗？

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8楼2010-12-29 11:25:28

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kong10

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Originally posted by henkally at 2010-12-29 11:28:37:

这个问题，我觉得大家搞复杂了。
LZ是测蛋白含量，后续测酶活。没必要进行纯化，去除叶绿素。但叶绿素的吸收峰和BRADFORD（考染法）反应后产物的吸收峰接近，肯定会有影响。所以可以换个蛋白含量测试方法， ...

BCA法测的准确度怎么样呢？对了，还想问问您，如果想去除样品里面的糖等物质，什么方法最可取？我也采用过硫酸铵沉淀，但是后面没看到沉淀，这个该怎么解释？灰常感谢

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12楼2010-12-29 11:33:43

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