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vs570588

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】DNA提取到测序步骤

我实验室从提取DNA到测序大的步骤如下
1，提取污泥中微生物DNA，跑电泳。
2，用源DNA做PCR,跑电泳。
3，用PCR样品做DGGE，并切取条带，溶于灭菌水。
4，用溶于灭菌水的条带，再做PCR，跑电泳，
5，切取第4步中电泳条带，溶于灭菌水。
6，用DNA纯化试剂盒纯化第5部所得样品。并跑电泳检测。
7，用第6步样品进行克隆后，送去测序。
现在问题是，做到第6步，用纯化试剂盒纯化的样品跑电泳条带特别暗，
我想问下大家，我的总体步骤哪里有问题？谢谢指教。

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1楼 2010-12-27 22:41:38

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rioarsenal

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by vs570588 at 2010-12-27 22:41:38:
我实验室从提取DNA到测序大的步骤如下
1，提取污泥中微生物DNA，跑电泳。
2，用源DNA做PCR,跑电泳。
3，用PCR样品做DGGE，并切取条带，溶于灭菌水。
4，用溶于灭菌水的条带，再做PCR，跑电泳，
5，切取第4步 ...

楼主用什么试剂盒纯化的？国产的一般效率都很低