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lixiaojing1318

银虫 (小有名气)


[求助] PCR中怎么避免单引物扩增?

PCR中怎么避免单引物扩增?

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爱mm

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-27 16:46:11:
做PCR的时候,设3管PCR,一个只加上游引物,一个只加下游引物,再一个就上上下游引物都加,这样就能够看出PCR产物是单引物扩增的还是双引物扩增的。可以试着优化一下条件,如果还不行,那就只能再设计引物了
还有 ...

你好,我想请教一个问题,不知你们做没做过单引物pcr,如果我想得到一条单链,应该注意些什么问题?谢谢!
木虫给力!
4楼2011-04-20 09:14:28
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yzxmichell

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

做PCR的时候,设3管PCR,一个只加上游引物,一个只加下游引物,再一个就上上下游引物都加,这样就能够看出PCR产物是单引物扩增的还是双引物扩增的。可以试着优化一下条件,如果还不行,那就只能再设计引物了
还有就是你的是简并引物还是特异性引物,如果是简并引物,这中情况比较常见,可以多测几个克隆子。
Nomoving!
2楼2010-12-27 16:46:11
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lixiaojing1318

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by yzxmichell at 2010-12-27 16:46:11:
做PCR的时候,设3管PCR,一个只加上游引物,一个只加下游引物,再一个就上上下游引物都加,这样就能够看出PCR产物是单引物扩增的还是双引物扩增的。可以试着优化一下条件,如果还不行,那就只能再设计引物了
还有 ...

谢谢,单引物对照也做过了,只能再设计引物了
3楼2011-04-16 20:40:38
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