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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】菌体煮沸后蛋白变性了吗？
汕头大学海洋科学接受调剂
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njauzx

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】菌体煮沸后蛋白变性了吗？

表达蛋白，收取200微升菌体，SDS，巯基乙醇缓冲液，煮沸10分钟，离心上样。此时的蛋白变性了吗？
如果变性了会不会沉淀？会不会在离心的时候离下去了？
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1楼 2010-12-24 15:41:20
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
njauzx(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):对，是这样，鼓励~~~ 2010-12-24 16:05:07
肯定是变性了，但是会溶在上样缓冲液里面，不会沉淀。
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2楼2010-12-24 15:47:38
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njauzx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-12-24 15:47:38:
肯定是变性了，但是会溶在上样缓冲液里面，不会沉淀。

就是想问这个！为什么溶在里面不会沉淀呢？是哪个组分的作用？
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3楼2010-12-24 15:48:27
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
njauzx(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-12-24 23:17:42
引用回帖:
Originally posted by njauzx at 2010-12-24 15:41:20:
表达蛋白，收取200微升菌体，SDS，巯基乙醇缓冲液，煮沸10分钟，离心上样。此时的蛋白变性了吗？
如果变性了会不会沉淀？会不会在离心的时候离下去了？

又是SDS，又是巯基乙醇，还煮沸，你说能不变性么？

加了SDS，都带电荷了，相互排斥，当然不会沉淀，变性电泳都这么跑。
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4楼2010-12-24 16:02:41
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
njauzx(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-12-25 09:03:34
变性不一定沉淀的，加SDS后都带电荷了，互相排斥的。
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5楼2010-12-24 22:56:44
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
njauzx(金币+1):谢谢参与
楼上所言极是
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6楼2010-12-24 23:24:11
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