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【求助/交流】菌体煮沸后蛋白变性了吗?
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njauzx
金虫
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[交流]
【求助/交流】菌体煮沸后蛋白变性了吗?
表达蛋白,收取200微升菌体,SDS,巯基乙醇缓冲液,煮沸10分钟,离心上样。此时的蛋白变性了吗?
如果变性了会不会沉淀?会不会在离心的时候离下去了?
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2010-12-24 15:41:20
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susizheng
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njauzx(金币
+1
):谢谢参与
rainwander(金币+2):对,是这样,鼓励~~~ 2010-12-24 16:05:07
肯定是变性了,但是会溶在上样缓冲液里面,不会沉淀。
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2010-12-24 15:47:38
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njauzx
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引用回帖:
Originally posted by
susizheng
at 2010-12-24 15:47:38:
肯定是变性了,但是会溶在上样缓冲液里面,不会沉淀。
就是想问这个!为什么溶在里面不会沉淀呢?是哪个组分的作用?
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3楼
2010-12-24 15:48:27
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rioarsenal
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njauzx(金币
+1
):谢谢参与
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-12-24 23:17:42
引用回帖:
Originally posted by
njauzx
at 2010-12-24 15:41:20:
表达蛋白,收取200微升菌体,SDS,巯基乙醇缓冲液,煮沸10分钟,离心上样。此时的蛋白变性了吗?
如果变性了会不会沉淀?会不会在离心的时候离下去了?
又是SDS,又是巯基乙醇,还煮沸,你说能不变性么?
加了SDS,都带电荷了,相互排斥,当然不会沉淀,变性电泳都这么跑。
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2010-12-24 16:02:41
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lxj341401
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njauzx(金币
+1
):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-12-25 09:03:34
变性不一定沉淀的,加SDS后都带电荷了,互相排斥的。
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2010-12-24 22:56:44
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brightfuture01
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njauzx(金币
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):谢谢参与
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6楼
2010-12-24 23:24:11
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