24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 4738  |  回复: 20

real-gold

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳

跑两个片段相近时琼脂糖凝胶电泳电压,电泳时间怎么确定?是电压高一点好,还是低一点好,时间怎么确定?如图1%胶,上样量5ul ,140V ,跑30min, 发现条带没有跑开,我是muti-pcr,在2000bp ,1800bp,2200bp会有条带。图上marker最亮的两条带分别是2000bp   1000bp.而且所跑的条带不整齐,微笑。是不是上样量太大的原因,还是因为。。。。?谢谢各位了!

[ Last edited by real-gold on 2010-12-17 at 09:34 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqt123_1981

木虫 (小有名气)



reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-12-19 07:08:47
我觉得你的电压有点高啊 。
2楼2010-12-17 09:47:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

金虫 (正式写手)


★ ★
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-12-17 11:05:24
虽然跑的不是很开,但已经分开了,可以试试marker多点几处或者点在中间,比较观察,也可以试试100V,45min的电泳条件,对于200bp ladder marker,这样算是跑的不错的效果的了~~
3楼2010-12-17 09:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦想起飞

铜虫 (小有名气)


★ ★
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-18 09:03:11
我也举得你的电压有点偏高了……降低电压,延长时间,试试
4楼2010-12-17 10:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwllkkhh

金虫 (小有名气)


偶没敢跑过这么高的电压,一般都是在100V左右
5楼2010-12-17 13:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)


我都是140V,不过一直没考虑过这个问题~今天了解了。。。
来学习学习~~
6楼2010-12-17 13:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dandan20088810

金虫 (初入文坛)


★ ★
reasonspare:这个建议?我不敢确认,因为我没有试过2%胶分离2kb,理论上1%胶对200bp差异还是能开出来的。谢谢你的建议。 2010-12-19 07:13:52
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-12-19 07:14:03
1800 2000 2200三条带差异不大,可能不好分,建议加大胶的浓度,2%或3%
7楼2010-12-17 15:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
电压高,pcr产物浓度高,两者都降低就解决了
8楼2010-12-18 01:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian52166

金虫 (小有名气)


我觉得可以分电压分时间跑跑试试,以前跑小分子量的试过,就是150V 5min,140V 5 min,120V  10min,100V  20min,不知道这个行不行
9楼2010-12-18 10:25:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)


俺一般120v~~~
10楼2010-12-18 15:08:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoxiang6521

铁杆木虫 (著名写手)


你可以灌竖长的胶;加大胶的浓度,可以2.5%;降低电压,这个肯定可以分出来的,多跑一段时间,甚至小的条带跑出去都没问题的
11楼2010-12-18 17:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)


试试用0.7的胶,尽可能的薄(6μl 满),跑你的样可能效果比较好。
12楼2010-12-18 21:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

real-gold

银虫 (小有名气)


[quote]Originally posted by sutao1979 at 2010-12-18 01:13:1

[ Last edited by real-gold on 2010-12-19 at 16:43 ]
13楼2010-12-19 16:42:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

real-gold

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jian52166 at 2010-12-18 10:25:28:
我觉得可以分电压分时间跑跑试试,以前跑小分子量的试过,就是150V 5min,140V 5 min,120V  10min,100V  20min,不知道这个行不行

第一次听说还有这样的跑法,什么原理?
14楼2010-12-19 16:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

real-gold

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by gaoxiang6521 at 2010-12-18 17:05:31:
你可以灌竖长的胶;加大胶的浓度,可以2.5%;降低电压,这个肯定可以分出来的,多跑一段时间,甚至小的条带跑出去都没问题的

楼下的为什么说要使用更低的胶浓度?胶浓度该怎么确定好?
15楼2010-12-19 16:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

200903015

铁虫 (初入文坛)


电压太高了,60至90就够了
16楼2010-12-19 18:38:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenxf861010

新虫 (初入文坛)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
是电压太高了,条带都没有跑开。我们都是跑90V的。
17楼2012-02-09 16:35:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chjinzhi

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你可以用2%的浓度,那样能够将条带分开。如果不是很明显,可以延长时间,不过跑胶的浓度还是要2%。
18楼2012-08-01 16:11:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
电压100  用1.5的胶跑时间长点  样点少点就可以啦
19楼2012-08-02 09:51:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongqifei

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1017338楼: Originally posted by dandan20088810 at 2010-12-17 15:43:42
1800 2000 2200三条带差异不大,可能不好分,建议加大胶的浓度,2%或3%

增加胶浓度对增加小片段DNA的分辨率效果明显。楼主的片段2000左右,我认为应该用更低浓度的胶来区分。
20楼2012-08-02 14:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qianshengguo

铜虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我一般160v,40min,如果用冰块的话,电压超过200v都可以
21楼2012-08-03 17:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 real-gold 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 化学070300 求调剂 +23 哈哈哈^_^ 2026-04-12 23/1150 2026-04-14 16:30 by zhouxiaoyu
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +14 电气李 2026-04-13 15/750 2026-04-14 14:58 by 逆水乘风
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 359求调剂 +5 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 19:55 by lbsjt
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 08:57 by zhq0425
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +4 加大号饭盒袋 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:52 by gong120082
[考研] 已调剂 +18 柴郡猫_ 2026-04-09 19/950 2026-04-09 22:10 by 柴郡猫_
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
信息提示
请填处理意见