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real-gold

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳

跑两个片段相近时琼脂糖凝胶电泳电压,电泳时间怎么确定?是电压高一点好,还是低一点好,时间怎么确定?如图1%胶,上样量5ul ,140V ,跑30min, 发现条带没有跑开,我是muti-pcr,在2000bp ,1800bp,2200bp会有条带。图上marker最亮的两条带分别是2000bp   1000bp.而且所跑的条带不整齐,微笑。是不是上样量太大的原因,还是因为。。。。?谢谢各位了!

[ Last edited by real-gold on 2010-12-17 at 09:34 ]
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real-gold

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jian52166 at 2010-12-18 10:25:28:
我觉得可以分电压分时间跑跑试试,以前跑小分子量的试过,就是150V 5min,140V 5 min,120V  10min,100V  20min,不知道这个行不行

第一次听说还有这样的跑法,什么原理?
14楼2010-12-19 16:47:12
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)



reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-12-19 07:08:47
我觉得你的电压有点高啊 。
2楼2010-12-17 09:47:17
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)


★ ★
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-12-17 11:05:24
虽然跑的不是很开,但已经分开了,可以试试marker多点几处或者点在中间,比较观察,也可以试试100V,45min的电泳条件,对于200bp ladder marker,这样算是跑的不错的效果的了~~
3楼2010-12-17 09:48:56
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)


★ ★
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-18 09:03:11
我也举得你的电压有点偏高了……降低电压,延长时间,试试
4楼2010-12-17 10:21:00
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