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real-gold

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳

跑两个片段相近时琼脂糖凝胶电泳电压,电泳时间怎么确定?是电压高一点好,还是低一点好,时间怎么确定?如图1%胶,上样量5ul ,140V ,跑30min, 发现条带没有跑开,我是muti-pcr,在2000bp ,1800bp,2200bp会有条带。图上marker最亮的两条带分别是2000bp   1000bp.而且所跑的条带不整齐,微笑。是不是上样量太大的原因,还是因为。。。。?谢谢各位了!

[ Last edited by real-gold on 2010-12-17 at 09:34 ]
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银虫 (小有名气)


[quote]Originally posted by sutao1979 at 2010-12-18 01:13:1

[ Last edited by real-gold on 2010-12-19 at 16:43 ]
13楼2010-12-19 16:42:13
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银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by jian52166 at 2010-12-18 10:25:28:
我觉得可以分电压分时间跑跑试试,以前跑小分子量的试过,就是150V 5min,140V 5 min,120V  10min,100V  20min,不知道这个行不行

第一次听说还有这样的跑法,什么原理?
14楼2010-12-19 16:47:12
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银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by gaoxiang6521 at 2010-12-18 17:05:31:
你可以灌竖长的胶;加大胶的浓度,可以2.5%;降低电压,这个肯定可以分出来的,多跑一段时间,甚至小的条带跑出去都没问题的

楼下的为什么说要使用更低的胶浓度?胶浓度该怎么确定好?
15楼2010-12-19 16:50:13
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