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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳
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real-gold

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于琼脂糖凝胶电泳

跑两个片段相近时琼脂糖凝胶电泳电压，电泳时间怎么确定？是电压高一点好，还是低一点好，时间怎么确定？如图1%胶，上样量5ul ，140V ，跑30min, 发现条带没有跑开，我是muti-pcr，在2000bp ，1800bp,2200bp会有条带。图上marker最亮的两条带分别是2000bp   1000bp.而且所跑的条带不整齐，微笑。是不是上样量太大的原因，还是因为。。。。？谢谢各位了！

[ Last edited by real-gold on 2010-12-17 at 09:34 ]
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1楼 2010-12-17 09:30:27
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hongqifei

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1017338楼: Originally posted by dandan20088810 at 2010-12-17 15:43:42
1800 2000 2200三条带差异不大，可能不好分，建议加大胶的浓度，2%或3%

增加胶浓度对增加小片段DNA的分辨率效果明显。楼主的片段2000左右，我认为应该用更低浓度的胶来区分。
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20楼2012-08-02 14:23:09
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-12-19 07:08:47
我觉得你的电压有点高啊 。
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2楼2010-12-17 09:47:17
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)
★ ★
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-12-17 11:05:24
虽然跑的不是很开，但已经分开了，可以试试marker多点几处或者点在中间，比较观察，也可以试试100V，45min的电泳条件，对于200bp ladder marker，这样算是跑的不错的效果的了~~
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3楼2010-12-17 09:48:56
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
★ ★
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-18 09:03:11
我也举得你的电压有点偏高了……降低电压，延长时间，试试
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4楼2010-12-17 10:21:00
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