版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

论文辅导

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tian1203

银虫 (著名写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 807.4
帖子: 2957
在线: 1166.3小时
虫号: 1051352

[交流] 【求助/交流】片段转进去，提质粒酶切发现载体小了，想不明白

1200的片段，转进4800的表达载体
阳性克隆检测非常亮且大小正确。提质粒酶切1200的片段也切了下来。

但是，用DL-5000检测发现载体比理论小了1000-2000bp。非常想不明白，
就是说4800的载体+1200的目的基因，单酶切后理论上应该6000，为啥我的片段看着不到5000？？质粒断了？？

可以确定不是空载体，550的片段以前也出现过这种情况
DL-5000没问题，因为同时跑了DL-2000。

回复此楼

» 猜你喜欢

关于举办2024年化工制药与材料类优秀大学生暑期夏令营的通知已经有0人回复
M9培养基浑浊已经有1人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有153人回复
面上评审意见-帮忙看一下等级（没上会）已经有81人回复
目的基因序列中有多个引物插入已经有1人回复
链霉亲和素磁珠偶联biotin修饰分子好还是点击反应偶联分子好？已经有0人回复
磁珠法纯化蛋白相比层析柱有什么优势？已经有3人回复
磁固相萃取在药物分析中有潜在应用价值吗？已经有0人回复
关于为什么要在生物传感形成图案的原因求助已经有0人回复
华东理工大学化工学院胡静课题组招博士生和博士后。欢迎有志科研青年加入！已经有0人回复
申博申博已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

重组的载体转到菌里再提质粒就变成这样了，也不知道能用不已经有3人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
看不见酶切后的小片段已经有12人回复
【求助】基因克隆T载体酶切问题等已经有8人回复
双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点已经有52人回复
129bp小片段从pGEM-T上酶切回收的问题已经有13人回复
载体酶切已经有13人回复
在基因重组过程中，怎样鉴别质粒载体是否被限制性内切酶切好？已经有10人回复
【求助/交流】连到pGEM-T载体上的PCR回收产物，提质粒后还需要做酶切验证吗？已经有13人回复
【求助/交流】构建表达载体时，提质粒用小提够用吗？已经有5人回复
【分享】关于载体双酶切的一些经验已经有19人回复
【求助/交流】载体酶切连接结果分析（附图）！！！已经有7人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2010-12-16 09:52:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xiaomu3811

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2312.6
帖子: 251
在线: 115.8小时
虫号: 639486

tian1203(金币+2):我的去测序，直接就失败 2010-12-26 14:29:00

引用回帖:

Originally posted by tian1203 at 2010-12-16 09:52:40:
1200的片段，转进4800的表达载体
阳性克隆检测非常亮且大小正确。提质粒酶切1200的片段也切了下来。

但是，用DL-5000检测发现载体比理论小了1000-2000bp。非常想不明白，
就是说4800的载体+1200的目的基因， ...

我也遇到了同样的情况，不知道是什么原因，我插入了一个约1800的片段，但是构建好的重组载体竟然比空载体小很多，但是我测序后证明了确实有我的目的片段插入。实在是解释不了，希望高手解答！

赞一下

回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

淡水生烟

14楼2010-12-24 16:54:36