24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhtongshi

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 87.6
帖子: 63
在线: 36.6小时
虫号: 1096012

[交流] 【求助/交流】DNA电泳

我最近在做连接，总是连不上，所以我想分析是哪步出问题。我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功，但不知道跑电泳能不能分辨出来(质粒大小10kb-12kb)，如果可以，琼脂糖浓度是多少。请各位高手给个帮助吧!

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有134人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2010-12-02 09:34:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
zhtongshi(金币+1): 2010-12-02 11:17:15
silicare(金币+3):谢谢参与 2010-12-02 12:07:47

引用回帖:

Originally posted by zhtongshi at 2010-12-02 09:34:48:
我最近在做连接，总是连不上，所以我想分析是哪步出问题。我想将酶切完的质粒载体与未酶切的质粒跑电泳看是否酶切成功，但不知道跑电泳能不能分辨出来(质粒大小10kb-12kb)，如果可以，琼脂糖浓度是多少。请各位高 ...

你是单酶切吧？双酶切的话，直接就能看到2条带了。
我觉得可以，你酶切后质粒成线状，条带会比超螺旋的靠后（片段显得大）。你用kit提出来的质粒都是超螺旋结构。胶浓度配稀点，但太稀就容易碎了。自己摸摸条件吧。0.8试试。

另外，我建议你转化后，板子一直放在37度里，有时候转化效率低，可能很久才长出斑来。我干过这种事，忘记拿出来了，放了2天，第一天什么都没有，第2天长了好多，最后测序，居然是我的东西。。。