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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌表达水溶性蛋白的条件
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wmqouc

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌表达水溶性蛋白的条件

各位大侠，大家好！
我要做约100个氨基酸的水溶性蛋白表达，在大肠杆菌中。
请问大家通常加入IPTG后温度降到多少，还有诱导培养多长时间啊？
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1楼 2010-11-23 23:04:20
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
各个蛋白不一样的，要自己优化.
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4楼2010-11-24 09:12:41
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 09:07:24
首先要看你目的蛋白的性质，有些蛋白很不容易溶解在胞质中。
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2楼2010-11-23 23:11:47
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tsingo

金虫 (正式写手)
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 09:05:51
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 15:31:53
高温表达容易形成包涵体，低温诱导表达会好一些，但低温诱导要时间长一些。100个氨基酸，小蛋白，容易表达，水溶性高，形成包涵体的可能性不大，但是小蛋白容易降解。不过要看你要表达的蛋白的性质了，说不定高温也可以，但是低温会保险一些。
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5楼2010-11-24 20:21:42
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piaopiao233

金虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流，挑逗不给奖励，交流可以，呵呵 2010-11-25 10:30:19
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 15:32:02
我们一般30度
有助于蛋白质的折叠和后期处理
要不然，不一定有酶活
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6楼2010-11-25 10:25:14
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xschenjing13楼
2010-11-23 23:18   回复  
scelab:交流贴请勿纯表！下次注意！否则扣回金币的啊 2010-11-23 23:46:31
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