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wmqouc

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】大肠杆菌表达水溶性蛋白的条件

各位大侠,大家好!
我要做约100个氨基酸的水溶性蛋白表达,在大肠杆菌中。
请问大家通常加入IPTG后温度降到多少,还有诱导培养多长时间啊?
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)


wmqouc(金币+1): 2010-11-25 09:07:24
首先要看你目的蛋白的性质,有些蛋白很不容易溶解在胞质中。
2楼2010-11-23 23:11:47
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各个蛋白不一样的,要自己优化.
4楼2010-11-24 09:12:41
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tsingo

金虫 (正式写手)


wmqouc(金币+1): 2010-11-25 09:05:51
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 15:31:53
高温表达容易形成包涵体,低温诱导表达会好一些,但低温诱导要时间长一些。100个氨基酸,小蛋白,容易表达,水溶性高,形成包涵体的可能性不大,但是小蛋白容易降解。不过要看你要表达的蛋白的性质了,说不定高温也可以,但是低温会保险一些。
5楼2010-11-24 20:21:42
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piaopiao233

金虫 (小有名气)



dhd997(金币+1):鼓励交流,挑逗不给奖励,交流可以,呵呵 2010-11-25 10:30:19
wmqouc(金币+1): 2010-11-25 15:32:02
我们一般30度
有助于蛋白质的折叠和后期处理
要不然,不一定有酶活
6楼2010-11-25 10:25:14
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简单回复
2010-11-23 23:18   回复  
scelab:交流贴请勿纯表!下次注意!否则扣回金币的啊 2010-11-23 23:46:31
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