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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】问一下PCR反应体系浓度换算的问题
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cookies12

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】问一下PCR反应体系浓度换算的问题

本人初学分子技术希望各位不要见笑。。。
很多文章中，在PCR反应体系中，经常这样写：20μL的反应体系、模板30ng、Mg2+ 2.0mM、dNTPs0.2mM、引物0.6μM、Taq酶2.0U。它们这些如果换算成体积的话，应该怎么算？我一见这些公式就头晕。。。装试剂的小管中也没有写着啊？
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1楼 2010-11-14 17:11:16
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
cookies12(金币+1):谢谢参与
模板需要定量，然后算出体积
dntp、镁离子、酶外包装上有浓度，换算一下即可
引物管子上有说明，一般按照它给的体积加水即可，然后换算
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3楼2010-11-14 17:58:08
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lyq06043106

木虫 (正式写手)
★
cookies12(金币+1):谢谢参与
这其中最重要的是模板的换算，看点的Buffer，一般是点5ul，其中最亮的那条是150ng，其余是50ng。然后就看你的样品亮度了，估计一下就行了。其余的东西看包转上的浓度就行
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2楼2010-11-14 17:56:13
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