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【求助/交流】问一下PCR反应体系浓度换算的问题
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铜虫
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[交流]
【求助/交流】问一下PCR反应体系浓度换算的问题
本人初学分子技术
希望各位不要见笑。。。
很多文章中,在PCR反应体系中,经常这样写:20μL的反应体系、模板30ng、Mg2+ 2.0mM、dNTPs0.2mM、引物0.6μM、Taq酶2.0U。它们这些如果换算成体积的话,应该怎么算?我一见这些公式就头晕。。。
装试剂的小管中也没有写着啊?
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2010-11-14 17:11:16
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lyq06043106
木虫
(正式写手)
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帖子: 800
在线: 423.6小时
虫号: 1037027
★
cookies12(金币
+1
):谢谢参与
这其中最重要的是模板的换算,看点的Buffer,一般是点5ul,其中最亮的那条是150ng,其余是50ng。然后就看你的样品亮度了,估计一下就行了。其余的东西看包转上的浓度就行
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2楼
2010-11-14 17:56:13
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虫子火箭兵
金虫
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虫号: 769811
★
cookies12(金币
+1
):谢谢参与
模板需要定量,然后算出体积
dntp、镁离子、酶外包装上有浓度,换算一下即可
引物管子上有说明,一般按照它给的体积加水即可,然后换算
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3楼
2010-11-14 17:58:08
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