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kakaqa

铜虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 997081

[交流] 【求助/交流】请教3000bp的条带的连接问题

我克隆基因扩增得到了一个3000bp的片段，现在问题来了，我们实验室只有pMD18-T这种载体，听说这种载体连接3000bp的片段有点难度，但也能连上，请教用这种载体连过3000bp条带的高手，连接体系是怎样的，多少度需要连接多久，我已经做了3次了，结果都是失败，相当的郁闷啊！！！

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1楼2010-11-11 18:59:10

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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by kakaqa at 2010-11-12 08:18:07:

我是用TAKARA的EXtaq做的，连了好多次都连不上，回收的条带很亮，但就是连接不上，真是郁闷死了，我是连接过夜的，现在又做了一次，希望能成功。哎，没办法，就碰运气了，载体本身只有2.7kb，希望这次运气不 ...

放4度过夜试试，我们这有这么连上的，用的载体和酶与你的一样