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gundamba

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做完连接转化居然掉下一段基因...?求答案已有10人参与

做连接,转化大肠,本来是6000的载体加1000多的片段,粗提质粒电泳图除了少量自连以外,其余都往下掉到了2000多的条带处。以前没有过这种情况,载体基础质粒是PUC19,做过很多次了,同实验室的人也发生了这种情况,没有连上反而掉了一大截(并不是转化时剪切作用掉下的那么一点,是很大一块),有哪位朋友能给个解释啊,着急死了!
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zgb1982

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用质粒电泳检测时,用什么marker判断质粒大小呢,和什么比掉了2000多呢!
2楼2010-11-11 10:53:41
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zgb1982

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2010-11-12 12:39:37:
是否是因为连接上了之后成环状了,然后Mark是检验线性片段大小的,所以环和线跑的速度不一样,所以才显示的位置不对应呢?
我猜的,不知道对不对

我觉得也是这样吧,你的酶切前的载体质粒和连接后的质粒是一起跑的胶吗?
10楼2010-11-12 14:18:51
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