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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做完连接转化居然掉下一段基因...？求答案
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gundamba

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做完连接转化居然掉下一段基因...？求答案 已有10人参与

做连接，转化大肠，本来是6000的载体加1000多的片段，粗提质粒电泳图除了少量自连以外，其余都往下掉到了2000多的条带处。以前没有过这种情况，载体基础质粒是PUC19，做过很多次了，同实验室的人也发生了这种情况，没有连上反而掉了一大截（并不是转化时剪切作用掉下的那么一点，是很大一块），有哪位朋友能给个解释啊，着急死了！
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1楼 2010-11-11 10:10:32
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zgb1982

木虫 (正式写手)
★
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用质粒电泳检测时，用什么marker判断质粒大小呢，和什么比掉了2000多呢！
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2楼2010-11-11 10:53:41
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zgb1982

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by amilie030312 at 2010-11-12 12:39:37:
是否是因为连接上了之后成环状了，然后Mark是检验线性片段大小的，所以环和线跑的速度不一样，所以才显示的位置不对应呢？
我猜的，不知道对不对

我觉得也是这样吧，你的酶切前的载体质粒和连接后的质粒是一起跑的胶吗？
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10楼2010-11-12 14:18:51
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