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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白可溶无酶活的悲剧，你遇到过吗？
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xinyaolu

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白可溶无酶活的悲剧，你遇到过吗？ 已有2人参与

本人在做原核表达，蛋白在胞内可溶（含有两对二硫键）但是没有酶活，请问各位有没有遇到过这种问题，可能的原因是什么？
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1楼 2010-11-10 19:28:49
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xinyaolu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xuweitao at 2010-11-11 10:54:19:
检查做体外反应时用底物是否真的是该酶的底物，各种辅酶或者反应要用的因子是否都给齐了，试剂是否都没问题，pH也可以调一下试试看。

实在不行就只能是运气差了，这种情况是会有的。

现在可溶蛋白体外添加0.4M精氨酸能得到酶活，但是在发酵过程中添加0.1-0.4M精氨酸都没有效果。 纠结中。。。。。
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3楼2010-11-14 20:37:50
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-14 21:14:18
检查做体外反应时用底物是否真的是该酶的底物，各种辅酶或者反应要用的因子是否都给齐了，试剂是否都没问题，pH也可以调一下试试看。

实在不行就只能是运气差了，这种情况是会有的。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-11-11 10:54:19
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