| 查看: 1971 | 回复: 8 | ||||
suyinling木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】真菌提DNA的方法 已有8人参与
|
| 除了研磨菌丝，有没有简便的方法，例如孢子液 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 土壤真菌 |
» 猜你喜欢
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有14人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有18人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有15人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
-
朋友圈看到的
已经有9人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有16人回复
-
放榜前的不淡定
已经有17人回复
-
科研孤儿太难了
已经有19人回复
-
明天应该可查了！？
已经有4人回复
-
什么时候开奖？
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 环境样品地下水中细菌总DNA的提取方法
已经有23人回复
- 求助——真菌DNA提取
已经有11人回复
- 有用过与 1.5ml离心管配套的研磨棒或者电动组织研磨器提真菌DNA的吗？
已经有9人回复
- 真菌基因组DAN提取图片，求高人指点
已经有20人回复
- 急求，提取曲霉类真菌基因组的方法！多谢各位啦
已经有4人回复
- 丝状真菌基因组提取
已经有7人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 用真菌CTAB方法提细菌DNA可否？
已经有6人回复
- 【求助/交流】怎么做都提不出DNA，请高手帮一下忙喽！！！！
已经有52人回复
- 【求助/交流】提取真菌DNA或RNA一定要液氮研磨吗？
已经有7人回复
- 【求助/交流】在真菌基因组中PCR基因，难吗？
已经有18人回复
- 【求助/交流】真菌提取基因组DNA的方法
已经有7人回复
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):good 2010-11-09 17:02:50
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):good 2010-11-09 17:02:50
|
CTAB法提取步骤： (1) 在7mL离心管中加入65℃预热的抽提液2.5mL。 (2) 加入1g样品液氮研磨，加入巯基乙醇50μL，上下震荡，使蛋白质变性沉淀， 65℃水浴1h，每隔10min颠倒混匀一次。 (3) 加入等体积（约3mL）的氯仿/异戊醇(24/1)混匀，除去蛋白质，4℃平衡离心，10000rpm，10min。 (4) 取上清（约2.5mL）到7mL管，加1/5体积（约0.5mL）65℃预热的CTAB/NaCl混匀，加入2mL的氯仿/异戊醇(24/1)混匀，4℃平衡离心，10000rpm，10min。 (5) 取上清，加等体积（约3mL）的CTAB沉淀液，颠倒混匀。65℃水浴30min至沉淀可见。4℃平衡离心，10000 rpm，10min后小心去上清。 (6) 沉淀用TE（0.5mL）溶解，加入等体积（约0.5mL）的酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提，4℃平衡离心，10000rpm，10min。 (7) 取上清加入2倍体积的无水乙醇（1mL），再加入1/10体积的NaAC （pH 5.2）约0.1mL。 (8) -20℃冰箱1h，4℃平衡离心，12000rpm，10min，弃上清，用70%酒精清洗2次，滤纸吸去多余水分，超净台吹干。 (9) 0.05mL TE溶解，-20℃保存。 |
2楼2010-11-09 14:31:43
wwllkkhh
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 651.4
- 散金: 180
- 帖子: 264
- 在线: 103.7小时
- 虫号: 852905
- 注册: 2009-09-21
- 性别: GG
- 专业: 病原真菌学
3楼2010-11-29 16:47:36
646800558
木虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 4332.5
- 散金: 23
- 帖子: 171
- 在线: 226.9小时
- 虫号: 1054171
- 注册: 2010-07-08
- 性别: MM
- 专业: 色谱分析
4楼2010-11-29 17:10:06
5楼2011-01-14 09:40:24
6楼2011-01-14 11:52:37
fungixx
至尊木虫 (文坛精英)
- MicEPI: 2
- 应助: 37 (小学生)
- 贵宾: 3.458
- 金币: 19627.6
- 散金: 18645
- 红花: 118
- 沙发: 273
- 帖子: 13324
- 在线: 2030.8小时
- 虫号: 860534
- 注册: 2009-09-30
- 专业: 抗肿瘤药物药理
7楼2011-01-14 12:50:04
wqj1988926
金虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1222
- 散金: 27
- 红花: 5
- 帖子: 929
- 在线: 225.6小时
- 虫号: 1156883
- 注册: 2010-11-27
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2011-01-14 16:47:26
zml2006009 
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 197
- 散金: 70
- 红花: 2
- 帖子: 140
- 在线: 199.2小时
- 虫号: 1120378
- 注册: 2010-10-12
- 性别: MM
- 专业: 数学物理
9楼2011-01-15 17:01:23
20