24小时热门版块排行榜    

查看: 1419  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhaohu200801

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】测序问题,求助高手。

做TA克隆时,测序结果只找到上游引物,找不到下游引物。经过BLast,相似度只有30%,不知道什么原因。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohu200801

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 胖无名 at 2010-11-06 22:23:18:
这个原因可多了,1 你测序是测通还是单向,2 克隆的片段多大,如果片段较长而又是单向测序的话,只找到一个引物是不足为奇的,3 送去测序的样品有没有经过酶切验证或菌落PCR验证,4 你是哪家给测的序,测错也不是 ...

我是测通,克隆片段不大,350bp左右,送去测序的样品经过了酶切验证和菌落PCR验证,都还不错,是华大基因公司给测的序,难道测错了?通过比对,相似度才只有30%。
7楼2010-11-07 19:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yynzcx

银虫 (小有名气)

恭喜!恭喜!
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2565295
2楼2010-11-06 12:43:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)

zhaohu200801(金币+1):哦,谢谢 2010-11-06 18:12:06
zhaohu200801(金币+1):再送你一个 2010-11-06 18:21:57
测错了。 我测序也会遇到这样的。 假阳性克隆。
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2567462&fpage=1
3楼2010-11-06 15:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohu200801

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yixuanwin at 2010-11-06 15:01:54:
测错了。 我测序也会遇到这样的。 假阳性克隆。
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2567462&fpage=1

长出来的菌不多,而且还挺小的,那到底是什么原因造成的假阳性克隆啊?是简并引物设计的不对吗?还是模板的问题啊?都研三了,实验做了一年多了还没点进展,急!
4楼2010-11-06 18:20:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见