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agloom

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】双酶切载体总是切不完全

用的是HindIII和xhoI双酶切(两个酶切位点距离不近),M buffer,切三上小时,切的不完全,连接转化后基本都是假阳性,延长酶切时间依然如此,请问各位有何高招。
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silicare

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agloom(金币+1):谢谢参与
dhd997:这个。你也纯表? 2010-11-01 18:55:28




这个是个测试帖子

[ Last edited by silicare on 2010-11-2 at 08:35 ]
2楼2010-11-01 14:37:22
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linqin1029

新虫 (初入文坛)


agloom(金币+1):谢谢参与
如果你使用的HindIII和xhoI双酶切不是快切酶的话,建议过夜切,
3楼2010-11-01 14:44:15
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liyong1981

金虫 (正式写手)



agloom(金币+1):谢谢参与
+BSA。过夜切~
4楼2010-11-01 14:48:00
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agloom(金币+1):谢谢参与
5楼2010-11-01 14:50:02
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xulanzzz

金虫 (著名写手)


agloom(金币+1):谢谢参与
是片段直接切的吗 如果是的话建议连接T载体 然后再切
DOBEST
6楼2010-11-01 14:53:31
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2585165

金虫 (正式写手)


agloom(金币+1):谢谢参与
多切几遍呗
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
7楼2010-11-01 15:00:42
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


agloom(金币+1):谢谢参与
减少载体量。
PS:看到斑斑纯表情。
Thank-you,so-blue.
8楼2010-11-01 15:13:48
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mooncakexzj

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主


agloom(金币+1):谢谢参与
减少载体量。
海上生明月,天涯共此时!
9楼2010-11-01 15:33:28
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liyong1981

金虫 (正式写手)


建议用NEB的酶,over
10楼2010-11-01 15:34:24
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