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布丁3835

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】色谱柱问题 已有1人参与

本人现做一个化药分析,才用了2个星期的安捷伦色谱柱,型号ZORBAX Eclipse XDB4.6*150,粒径5um的柱子,现在主峰出现后延肩峰,而且峰变宽了,分离效果明显下降。每次用完之后都会用10%的甲醇以1.0的流速先冲一个小时,接着过度到100%的甲醇,由于样品是溶于甲醇的,完了之后用纯甲醇保存柱子。请教各位大侠怎么样恢复柱效,改善峰形,毕竟这是一根新柱子,不能就这么夭折了吧,谢谢。
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布丁3835

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-10-28 14:03:17:

150pa算比较高了,能把具体流动相说一下吗,特别是缓冲盐和最后一个梯度

流动相A:约0.65g磷酸铵和2g四丁基氢氧化氨溶于500ml水,用磷酸调ph为7.5左右。
流动相B是纯甲醇。
最后一个梯度是25分钟90%的B过渡到26分钟时60%的B,梯度应该没什么问题,根据药典上做的调整
7楼2010-10-28 14:08:05
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音


布丁3835(金币+3):谢谢参与
冲柱方法没有问题,不应该是冲柱子的问题,还有两个楼主没说清楚,1。样品干不干净,2。实验时柱压是多少,现在柱压多少,从买来到现在柱压变化
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-10-28 13:19:40
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布丁3835

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-10-28 13:19:40:
冲柱方法没有问题,不应该是冲柱子的问题,还有两个楼主没说清楚,1。样品干不干净,2。实验时柱压是多少,现在柱压多少,从买来到现在柱压变化

实验时柱压约150bar,从使用到变化之前柱压都没什么变化;样品是实验室合成的,说不清干不干净;流动相里头有缓冲盐,走梯度。
3楼2010-10-28 13:59:41
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lfycdymax

铁杆木虫 (著名写手)


布丁3835(金币+3):谢谢参与
也的样品本身对柱子就是一个伤害……
突然好想你……
4楼2010-10-28 14:01:09
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