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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE蛋白电泳 样品中盐浓度和pH值对条带有影响?已有7人参与

各位
这几天一直跑电泳,情况不大好,条带很粗还有偏移。我的样品中盐离子浓度蛮高的,各个样品的pH值有些差别,不知道这对条带有没有影响?要怎么处理呢?谢谢!!
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)

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dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-15 14:35:05
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2楼2010-10-15 13:13:53
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gdxinlan at 2010-10-15 13:13:53:
pH只要不极端就可;
盐浓度影响较大,要脱盐的

因为蛋白浓度不高 我就是怕透析什么的蛋白就更少了
3楼2010-10-15 22:03:05
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xmasylm

铜虫 (初入文坛)

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reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-10-16 04:57:28
盐浓度对电泳影响很大
4楼2010-10-16 00:25:14
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xmasylm at 2010-10-16 00:25:14:
盐浓度对电泳影响很大

因为蛋白浓度不高 我就是怕透析什么的蛋白就更少了 还有别的方法吗
5楼2010-10-16 21:05:31
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)


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6楼2010-10-16 21:29:40
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2009227004

金虫 (正式写手)

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看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-17 00:12:00
可以稀释一下再跑看看,如果还是不行的话,说明影响很大,只能透析,或者浓缩也可以。。。我有试过盐析完后稀释跑电泳,条带就会比较清晰!!!!
当别人都在假装正经的时候,我就假装不正经。
7楼2010-10-17 00:11:24
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gdxinlan at 2010-10-16 21:29:40:



透析+浓缩

好 我试试 那一般有蛋白含量在多少跑出来效果比较好呢 谢谢
8楼2010-10-17 15:20:49
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 2009227004 at 2010-10-17 00:11:24:
可以稀释一下再跑看看,如果还是不行的话,说明影响很大,只能透析,或者浓缩也可以。。。我有试过盐析完后稀释跑电泳,条带就会比较清晰!!!!

好 我试试 那你跑的时候一般有蛋白含量在多少跑出来效果比较好呢 谢谢
9楼2010-10-17 15:21:30
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2009227004

金虫 (正式写手)

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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-17 19:01:29
这个具体没算过了,反正盐析后沉淀一般是用3-4倍的体积溶解,然后再稀释个2-3倍就可以跑得还不错,具体的情况你可以自己摸索一下!!!
当别人都在假装正经的时候,我就假装不正经。
10楼2010-10-17 17:03:43
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